目的:通过微量富集和模糊衍生方法初步建立抗结核新型药物筛选平台,并从已知抗结核药物中筛选新的活性成分。方法:将异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、链霉素(SM)、卡那霉素(KM)、阿米卡星(AMK)、氧氟沙星(Ofx)、左氧氟沙星(Lfx)、加替沙星(Gfx)、莫西沙星(Mfx)、对氨基水杨酸钠(PAS)和丙硫异烟胺(Pto)共12种抗结核药物进行模糊衍生,并对衍生后产生的新成分进行微量富集筛选抗结核新成分。将上述药品分别配制成0.5%的甲醇溶液,每种药品溶液以线条状上样在一张薄层板上,并在薄层板上进行模糊衍生。将衍生的混合物进行二维薄层色谱(2D-TLC)展开,在第一个维度将药品衍生物中的成分根据不同极性进行分离,形成条状谱带,然后将薄层板平行旋转90°进行二维展开,把条状谱带推至薄层板边缘并聚集为点状谱带,达到微量成分富集的作用。将点状谱带逐一分割,分别置于铺满结核分枝杆菌(MTB)的培养基上,37°C恒温培养箱培养4-8周,观察各谱带的抑菌作用。结果:INH和EMB两组中存在相应谱带区域有抑制MTB生长的作用,其中INH组的抑菌实验的灵敏度和特异度较高,进一步分割INH(INH对照组)和INH I(INH衍生物组)的抑菌区域逐一谱带进行培养,从而得出INH I(4号谱带)具有显著抑制敏感结核分枝杆菌和耐药结核分枝杆菌生长的作用,INH I组中可能产生了新成分。结论:初步建立了微量富集方法和模糊衍生技术筛选抗结核新药的平台,使数个实验室工作在同一张薄层板上进行,从而具有高效、低成本和省时省力等优点。本技术可把已知抗结核药物中的微量成分分离出来,通过体外抑菌实验,从已知的药物中发现抗结核新成分。在此平台基础上,初步从INH的衍生物中筛选出抗结核新成分,为药物的分离、筛选及新药的研发奠定了基础。