乳脂乳球菌W56抗噬菌体机制的分子生物学研究

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该论文主要研究质粒pJW566编码的LlaBIIIR/M系统.在含有新生霉素的梯度平板上消除Marker质粒pSV2,得到只含有质粒pJW566的菌株MG1614[pW566].经过不同限制性内切酶的切割和连接,绘制了质粒pJW566内切酶图谱,其中质粒pJW566上具有唯一的SpeI,SphI,NsiI及SacI的酶切位点,含有7个ClAI酶切位点.际制性内切酶活性测定表明,LlaBIII内切酶需要Mg<2+>、ATP,AdoMet对酶活性有刺激作用,此结果符合typeI内切酶特征,并与LlaBIII基因结构和功能分析一致.但是体内切酶活性表达重复性较差,经过不同的柱层析均未检测到内切酶活性,推测LlaBIII内切酶除需上述三种复合因子外,还需要其它体内因子的参与,详细机制有待进一步的研究.通过LlABIII基因的PCR产物及SphI-HindIII片段的克隆与连接,出现了异常的插入处段.造成的原因有待研究.以上研究表明,LlaBIII的基因结构、具有的生物功能及异常的实验象应属于typeI的一个变种,是一个新的R/M系统.
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