目的与意义:奶牛酮病是围产期奶牛多发的一种代谢性疾病。Β-羟丁酸(BHBA)是酮体的主要成分,高水平BHBA可诱导奶牛发生氧化应激及炎性反应,导致泌乳量下降,产后疾病多发,严重影响奶牛繁殖性能。原花青素(Proanthocyanidis,PCs)作为自然界常见的植物提取物,它强大的抗氧化能力体现在高效清除体内氧化自由基,提升机体抗氧化能力等,广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。本研究的目的是确定PCs能否通过Nrf2/ARE信号通路对BHBA诱导的牛子宫内膜细胞(BEND)氧化损伤起到保护作用。试验方法:通过CCK-8检测6 h,12 h,24 h,48 h分别加入不同浓度BHBA、PCs对BEND细胞存活率的影响,确定药物的最佳浓度、最佳作用时间及最佳联合用药方式。通过氧化指标试剂盒试验方法检测BHBA、PC对BEND的氧化作用的影响,并进一步通过q PCR及Western-blot等试验方法检测0.6,1.2,2.4mmol/L BHBA对BEND细胞Nrf2/ARE信号通路相关基因m RNA及蛋白的表达水平变化的影响。试验结果:(1)BHBA可引起BEND细胞GSH、T-AOC含量和CAT活性显著降低,MDA含量显著升高,导致细胞发生氧化应激。PCs可显著增加BEND细胞GSH、T-AOC含量及CAT、GSH-PX活性,显著降低MDA含量,但并未对SOD活性产生显著影响。(2)BHBA可显著促进BEND细胞GCLC m RNA表达,但对Mn-SOD,NQO-1和Nrf2 m RNA的表达没有产生显著影响。而与BHBA组相比,PCs+BHBA联合处理组中GCLC,Mn-SOD,NQO-1和Nrf2 m RNA表达水平均显著增加;BHBA可显著增加BEND细胞GCLC,HO-1,NQO-1和Nrf2的蛋白表达水平。而与BHBA处理组相比,PCs+BHBA联合处理组的GCLC,HO-1,NQO-1和Nrf2蛋白表达水平均显著增加。试验结论:高浓度BHBA可诱导BEND细胞发生氧化损伤,而PCs可通过激活Nrf2信号通路,调控氧化应激相关基因的表达,从而有效拮抗BHBA诱导的BEND细胞氧化损伤。