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肉碱是动物体内常见含氮非蛋白质类小分子,已被广泛应用于机能性食品添加剂、饲料添加剂及药品领域。1、肉碱柱前衍生-高效液相色谱检测方法的建立及优化:本章实验建立了柱前衍生正相高效液相色谱法检测肉碱。本文考察了流动相、柱温对色谱峰的影响等方面、对样品处理方法及衍生化反应的条件进行优化,建立了相应的高效液相色谱法:Kromasil Sil色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-柠檬酸缓冲液(90:10;V/V),每1000 mL流动相中加入0.25mL三乙胺;流速1.2mL/min;柱温:35℃;检测波长260 nm;进样量为20μL。对比两种不同浓度的衍生试剂后,选取10%的对溴苯乙酰基溴为衍生试剂;确定了肉碱在最佳水浴条件为:肉碱在70℃水浴90min。方法学上考察结果表明,该方法专属性高,具有较好的重复性,且线性关系、精密度均达到要求,可将其作为检测L-肉碱的分析方法。2、肉碱在罗非鱼体内的药代动力学研究本实验分别比较了不同剂量肉碱在罗非鱼体内的药代动力学规律及相同剂量的肉碱在不同规格罗非鱼体内的药代动力学规律。血药浓度-时间数据采用WinNonlin 5.2软件非房室模型统计矩方法进行分析,实验结果表明,药物的剂量和试验鱼的规格对肉碱在罗非鱼提的药代动力学参数均有影响。以12mg’kg-1和120mg.kg-1体重剂量口灌给药后,两组的达峰时间相同,清除率及平均滞留时间差异不显著(p>0.05),但12 mg.kg-1体重剂组的达峰浓度(82.28 μmOl.L-1)、药时曲线下面积(431.06 h·μmol·L-1)显著高于120 mg-kg-1体重剂量组的达峰浓度(21.27 μmol·L-1)、药时曲线下面积(96.95 h·μmO1.L-1);说明剂量对肉碱的吸收有影响。研究相同剂量的肉碱在不同规格罗非鱼体内的药代动力学规律时发现,肉碱在罗非鱼体内的达峰浓度(Tmax)、消除半衰期(t1/2)和清除率(Clz/F)均随年龄的升高而变小,但差异不显著(p>0.05);从药时曲线下面积可看出,药物在成鱼分布程度较未成熟鱼广泛。本论文首次以罗非鱼为对象测定血浆中的肉碱含量,建立了检测血浆中肉碱的高效液相色谱方法,比较了不同剂量及不同规格试验鱼对肉碱在罗非鱼体内的药动学规律,其对水产品中该类化合物的含量分析、食品营养及安全的评定有着重要的、深远的意义,同时也是其研究开发的必备前提和条件。