锌、硒和中草药提取物对3D4/2猪肺泡巨噬细胞功能的影响

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:supermilk009
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本试验旨在探讨不同锌源(硫酸锌/甘氨酸锌,ZnSO4/ZnGly)、硒源(亚硒酸钠/硒代蛋氨酸,Na2Se03/Se-Met)、黄芪多糖(APS)、刺五加皂苷B(ASS)、人参皂苷F3(GS)、绿原酸(CGA)、党参炔苷(LT)和左旋咪唑(LD)对3D4/2猪肺泡巨噬细胞功能的影响。将不同浓度的锌、硒、中草药提取物等分别与3D4/2猪肺泡巨噬细胞、LPS或环磷醜胺(CY)诱导下3D4/2猪肺泡巨噬细胞体外共培养,采用吞噬中性红法测定细胞吞噬功能,CCK-8法测定细胞增殖能力,ELISA法检测细胞上清中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10炎性细胞因子。结果如下:1、10 μg/ml LPS可极显著提高3D4/2猪肺泡巨噬细胞增殖和吞噬(P<0.01),显著促进 NO、TNF-a、IL-lβ、IL-10 和 IL-6 分泌(P<0.05);500μg/ml CY 诱导能极显著降低3D4/2细胞增殖力和吞噬功能(P<0.01)。2、ZnS04(10、20 μmol/1)能显著提高3D4/2猪肺泡巨噬细胞增殖和吞噬(P<0.05),且ZnS04(20 μmol/1)的增殖作用显著高于 ZnGly(P<0.05),ZnGly(10、20 μmol/1)的吞噬作用极显著高于ZnS04(P<0.01),而80μmol/l时,两锌源均能极显著降低细胞增殖和吞噬(P<0.01)。ZnS04和ZnGly(10、20μmol/l)能显著提高LPS诱导的3D4/2猪肺泡巨噬细胞增殖和吞噬(P<0.05),ZnGly(10 μmol/l)的吞噬能力显著高于ZnS04(P<0.01),ZnS04(10、20、40μmol/l)的增殖作用显著高于ZnGly(P<0.05);而两锌源(80 μmol/1)能极显著降低细胞的增殖和吞噬作用(P<0.01)。ZnS04和ZnGly(10~40μmol/1)均可显著缓解CY对细胞增殖的抑制作用(P<0.05);ZnGly(20、40 μmol/1)可显著提高CY作用的3D4/2猪肺泡巨噬细胞吞噬力(P<0.05)。ZnS04和ZnGly(10、20μmol/l)能显著降低 LPS 诱导下 3D4/2 细胞释放 NO、TNF-a、IL-lβ、IL-6 和 IL-10(P<0.05),ZnGly(20.μmol/1)的 NO 和 IL-10 产量显著低于 ZnS04(P<0.05)。3、Na2Se03(0.5、1 μmol/1)和 Se-Met(0.1、0.5、1、5、10 μmol/l)能显著提高3D4/2 细胞增殖(P<0.05),且 Se-Met(10 μmol/1)极显著高于 Na2Se03(P<0.01);Na2Se03和 Se-Met(0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1 μmol/1)能极显著增强细胞吞噬活性(P<0.01),且Se-Met显著高于Na2Se03(P<0.05);Na2SeO3(10 μmol/l)能极显著抑制细胞吞噬(P<0.01),而Se-Met(5、10 μmol/l)能极显著提高细胞吞噬(P<0.01),且极显著高于Na2Se03(P<0.01)。与 LPS 组比,Na2Se03(0.5、1、5、10μmol/l)、Se-Met(1μmol/l)能显著提高LPS诱导下3D4/2细胞增殖(P<0.05),且Na2Se03(0.5、10 μmol/1)显著高于 Se-Met(P<0.05);Na2Se03(0.005~10μmol/l)、Se-Met(0.005、0.05、0.5、5、10μmol/1)能极显著提高 3D4/2 细胞吞噬(P<0.01),且 Na2Se03(0.01,0.05、0.1、1、5μmol/1)显著高于 Se-Met(P<0.05)。Na2Se03 和 Se-Met(0.5~1 μmol/l)能显著提高细胞增殖(P<0.05),缓解CY的细胞增殖抑制作用,且Na2Se03(0.1、0.5 μmol/l)显著低于Se-Met(P<0.05);Se-Met(0.1、0.5μmol/l)能显著增强细胞吞噬能力(P<0.05),且 Se-Met 显著高于 Na2SeO3(P<0.05)。Na2Se03 和 Se-Met(0.1、0.5 μmol/1)能显著降低 LPS 诱导下3D4/2 细胞释放 NO、TNF-a、IL-1β、IL-6(P<0.05),Na2SeO3(0.5 μmol/1),且 IL-10 产量显著高于Se-Met(P<0.05)。4、在 25~200 μg/ml 时,APS、LT、ASS、CGA、(5~40 μg/ml)GS 和 LD(50、100 μg/ml)对细胞增殖无显著副作用(P>0.05)、且均能显著增强细胞吞噬能力(P<0.05),ASS(50~200 μg/ml)、CGA(25 μg/ml)也能显著提高细胞增殖能力(P<0.05),但 LD(200、400μg/ml)显著降低细胞增殖和吞噬作用(P<0.05),CGA(100、200μg/ml)能显著抑制细胞增殖活性、极显著提高单个细胞吞噬能力(P<0.01)。与LPS组比。ASS、LT(25~50(μg/ml)、GS(40 μg/ml)、CGA(25~50 μg/ml)和 LD(100 μg/ml)均能显著提高细胞的增殖和吞噬(P<0.05);而LD(200、400 μg/ml)的细胞增殖作用显著降低(P<0.05)、单个细胞吞噬显著升高(P<0.05),CGA(200 μg/ml)和APS(25~200 μg/ml)显著抑制细胞的吞噬(P<0.05)。APS(25~100 μg/ml)、ASS(25~100 μg/ml)、GS(10~40 μg/ml)和CGA(100 μg/ml)均能显著提高CY抑制下细胞增殖活性(P<0.05);GS(40 μg/ml)和CGA(100μg/ml)均能显著增强细胞吞噬能力(P<0.05)。ASS(25、50μg/ml)能显著减少NO、IL-iβ和IL-6的释放(P<0.05),LT(25、50μg/ml)能显著降低细胞释放NO、TNF-a、IL-iβ、IL-6(P<0.05)、提高 IL-10 的分泌量(P<0.05);CGA(25、50μg/ml)能显著降低细胞释放 NO、IL-lβ、TNF-a、IL-6、IL-10分泌(P<0.05);GS(5、10μg/ml)能显著降低细胞NO、IL-iβ、IL-6分泌(P<0.05)、提高IL-10分泌(P<0.05);LD(50~l00μg/ml)能显著降低细胞分泌NO、TNF-a、IL-6(P<0.05)、显著提高IL-10的分泌(P<0.05),提高3D4/2巨噬细胞抗炎能力。以上结果表明:不同的锌、硒、CGA、ASS、LT、LD、GS能促进3D4/2猪肺泡巨噬细胞和LPS或CY诱导下的细胞增殖和吞噬功能,不同程度地降低NO、TNF-a、IL-lβ、IL-6抗炎因子过度分泌,LT、GS、LD能提高IL-10抑炎因子分泌;APS可增强3D4/2猪肺泡巨噬细胞吞噬功能,缓解CY对细胞增殖的抑制作用。
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