本研究分别从流行病学调查、动物实验、临床研究探讨PROM对胎儿健康的危害，并着重研究了PROM对胎肺发育的影响，期望充分认识PROM的危害及其在肺疾病发生中的作用，为临床诊治提供理论依据。 第一部分:胎膜早破对新生儿健康危害的流行病学调查 目的:探讨胎膜早破（PROM）对新生儿健康的影响。 方法:对2003.01～2008.03月间六家医院的分娩总例数、合并PROM的分娩例数进行统计；对3320例住院新生儿进行回顾性分析。随机选取各100例足月及早产PROM患儿，与50例正常新生儿进行对比。数据结果用SPSS13.0统计软件进行分析。 结果：6家医院分娩总数为149200例，其中PROM29143例，发生率为19.53%；3320例住院患儿中PROM患儿711例，占21.42%，足月儿发生率为9.69%（196/2022），早产儿为39.68%（515/1298），两组差异有统计学意义（P<0.001）。早产PROM占PROM患儿住院比例的72.43%（515/711）。PROM患儿中呼吸窘迫综合征69例，占9.7%，足月儿5.1%（10/196），早产儿11.5%（59/515）。711例PROM患儿中，窒息发生率为15.0%（99/660），非PROM住院患儿的窒息发生率7.6%（199/2609）。25%的PROM患儿（178例）发生各种感染性疾病，其中感染性肺炎92例（12.9%），败血症63例（8.9%），两者占感染性疾病的87.1%；其它感染性疾病23例（3.2%），占感染性疾病的12.9%。163例患儿作血培养，阳性率38.7%（63例），主要致病菌为G+球菌（45.9%）和G-杆菌（54.1%），G+球菌主要包括溶血性葡萄球菌和表皮葡萄球菌（16例），G-杆菌主要包括肺炎克雷伯菌（19例）和大肠杆菌（9例）。另外2例早产儿培养出真菌（3.2%）。PROM的足月儿和早产儿总胆红素水平接近，但早产儿超过220umol/L的异常率（37.1%）高于足月儿（P<0.05）。与正常组比较，PROM患儿的血小板计数减少，宽度变窄，血小板平均容积增加（P<0.01）。其红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积等参数高于正常组（P<0.05），但红细胞分布宽度无明显差异（P>0.05）。心肌酶谱则明显异于正常组（P<0.05）。PROM对血清电解质水平无明显影响（P>0.05）。PROM患儿的平均住院时间较正常组分别延长20.0%（足月组）和25.1%（早产组）（P<0.05）；足月儿的平均住院费用增加30.5%，早产儿则增加60%（P<0.05）。 结论: PROM可对新生儿健康造成多方面危害，应加强对PROM的研究，及时采取合理措施，减少对新生儿健康的危害。 第二部分:胎膜早破对胎兔肺发育的影响 第一章、胎膜早破动物模型的建立及其对胎肺形态结构的影响 目的:利用羊膜腔内感染模型，研究胎膜早破的感染环境对胎儿肺形态发育的影响。 方法:选取健康成年育龄日本大耳白兔20只，成功受孕后随机分为对照组、干预组：细菌组、细菌+PS（猪肺磷脂注射液）组。对照组和细菌组按胎龄又分21d、22d、23d、24d、26d五个亚组；细菌+PS组分24d、26d两个亚组，每亚组孕兔例数2只。以上各组于不同胎龄日期分别进行宫内注射大肠埃希氏菌和/或PS，建立羊膜腔内感染动物模型。模型建成后19.5h对孕兔施行剖宫产，杀取胎兔后取肺组织，左上肺制作超薄切片，电子显微镜观察肺超微结构变化；左下肺制作石蜡切片，HE染色后光镜观察肺组织形态结构，并对胎肺感染程度进行分度、评估；数据分析用SPSS13.0进行X2检验及非参数检验。 结果:实验各组所有孕兔注射后均成活，饮食、活动自如。细菌组总死胎率24.62%，而细菌+PS组和对照组则分别为8.3%、7.3%，不同组别胎兔死胎率差异具有统计学意义（X2=6.884，P=0.032）。对照组子宫和胎盘组织病理检查未见明显炎性病变，干预组则可见子宫及胎盘炎性改变。干预组各组胎肺组织均有不同程度肺泡间隔增宽、细胞水肿、毛细血管充血、出血，支气管管腔、肺泡腔、血管腔内有炎细胞浸润，不同组别的胎肺感染程度之间差异具有统计学意义（X2=17.533，P=0.000）。细菌组肺泡间隔增厚，肺泡大小不均，有肺泡萎陷、局部肺不张、肺泡破裂并融合现象，可见肺泡腔内出血、透明膜形成。细菌+PS组与细菌组相比，肺泡间隔变薄，肺泡腔样结构大且规则，出血、水肿及肺不张、透明膜形成均有明显减轻。电镜下注射细菌的胎兔肺组织内可见散在的大肠杆菌菌体，菌体核膜较厚，染色质深染，ATⅡ细胞数量减少，板层小体数目减少，可见聚集、排空现象，细胞游离面微绒毛脱落，线粒体肿胀，线粒体嵴断裂，胞核结构松散、水肿，胞质内细胞器少，并有核染色质凝聚等细胞凋亡现象。加注PS后胎兔肺组织ATⅡ细胞数量及板层小体数量增多，部分板层小体散落至肺泡腔，并呈分泌状或空泡化改变。 结论:成功建立胎膜早破羊膜腔内感染动物模型。羊膜腔内感染可导致胎肺形态结构变化，阻碍肺发育成熟；注射PS后可改善肺形态的病理变化，对胎肺成熟具有促进作用。 第二章、白介素8在胎膜早破胎肺发育中的作用 目的:利用胎膜早破羊膜腔内感染动物模型，研究胎肺发育中白介素8（IL-8）的表达变化。 方法:所需实验动物来自之前所建动物模型，胎兔肺组织左下肺制作石蜡切片，以鼠抗兔IL-8单克隆抗体为一抗，用免疫组化方法检测肺组织内IL-8表达；右上肺用RT-PCR方法检测IL-8 mRNA表达；右下肺用Western Blot方法检测IL-8蛋白表达；用SPSS13.0软件进行统计学处理，采用析因设计资料方差分析和单因素方差分析方法。 结论:胎膜早破羊膜腔内感染可使胎兔肺组织中IL-8蛋白、mRNA异常高表达，与生后肺疾病发生关系密切；给予羊膜腔内注射PS可使IL-8表达稍有下降，因此可能对抑制炎性反应，改善肺损伤，改善感染结局具有一定促进作用。 第三章、转化生长因子β1在胎膜早破胎肺发育中的作用 目的:利用胎膜早破羊膜腔内感染动物模型，研究胎肺发育中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达变化。 方法:所需实验动物来自之前所建动物模型，胎兔肺组织左下肺制作石蜡切片，以兔TGF-β1多克隆抗体为一抗，用免疫组化方法检测肺组织内TGF-β1表达：RT-PCR方法检测右上肺TGF-β1 mRNA表达；Western Blot方法检测右下肺用TGF-β1蛋白表达；数据用SPSS13.0进行析因设计资料方差分析和单因素方差分析。 结论:TGF-β1参与正常肺发育过程，胎膜早破羊膜腔内感染可导致其过度高表达，从而干扰胎肺正常发育和成熟，是新生儿发生各种肺疾病的危险因素。给予羊膜腔内注射PS可使TGF-β1表达稍有下降，但仍高于对照组，表明PS宫内注射对TGF-β1表达无明显影响。 第四章、肺表面活性相关蛋白A在胎膜早破胎肺发育中的作用 目的:利用胎膜早破羊膜腔内感染动物模型，研究胎肺发育中肺表面活性相关蛋白A（SP-A）的表达变化。 方法:实验动物同前，胎兔肺组织左下肺制作石蜡切片，以兔SP-A多克隆抗体为一抗，用免疫组化方法检测肺组织内SP-A表达；RT-PCR方法检测右上肺SP-A mRNA表达；Western Blot方法检测右下肺用SP-A蛋白表达；数据用SPSS13.0进行析因设计资料方差分析和单因素方差分析。 结论:羊膜腔内感染可导致SP-A异常低表达，与新生儿RDS发生密切相关；羊膜腔内注射PS后SP-A表达上调，表明羊膜腔内注射PS可做为一种安全、有效的预防治疗手段，对降低生后新生儿发生NRDS等肺疾病具有重要意义。 第三部分:胎膜早破对胎儿肺发育的影响 目的:研究胎膜早破胎儿肺的形态结构变化，检测IL-8、SP-A和TGF-β1在人胎肺中的表达，探讨胎膜早破对胎肺发育的影响。 方法:收集水囊引产的胎儿6例，胎龄为21-32周，包括非PROM胎儿4例及PROM胎儿两例，胎膜早破时长分别为8周和72小时。娩出后肺组织取材，石蜡切片观察肺组织结构变化，透视电镜观察肺超微结构；并分别用免疫组化、RT-PCR、Western Blot技术检测胎肺内IL-8、TGF-β1、SP-A mRNA及蛋白表达。 结果:PROM胎儿肺组织中炎细胞浸润，胞核出现异染色质固缩，部分细胞膜破裂、溶解；超微结构显示内质网扩张、线粒体肿胀、微绒毛数量减少，板层小体电子密度低，出现空泡状改变；肺组织内IL-8、TGF-β1 mRNA及蛋白表达高于非PROM胎儿；而SP-A mRNA及蛋白表达较非PROM胎儿下降。 结论:PROM改变胎肺正常结构形态，影响胎肺正常发育，并使IL-8、TGF-β1、SP-A表达异常。