绵羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)是一种由绵羊肺腺瘤逆转录病毒(jaagsiekte sheepretrovirus,JSRV)感染引起的绵羊常见的传染性肺脏肿瘤疾病。病羊前期表现为进行性消瘦、鼻液增多,后期出现呼吸困难,最终窒息死亡。本实验室前期研究发现,自然感染OPA的晚期绵羊肺组织中自噬相关基因MAP1LC3B和BECN1的表达水平极显著低于健康肺组织,推测细胞自噬可能与OPA的发生有关。并且,在肿瘤发展的不同阶段中细胞自噬水平有所不同,发挥的作用也不尽相同。为了进一步研究细胞自噬在OPA发生发展过程中的作用,本研究先利用PCR、H.E染色、免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)和蛋白质免疫印迹(western blot,WB)等方法鉴定出健康羔羊肺组织和自然感染OPA的羔羊早期病肺组织各3份。再以OPA病肺组织为试验材料、健康肺组织为对照组,利用IHC、实时荧光定量PCR(real-time quantitative,qPCR)和WB等方法综合检测了自噬基因MAP1LC3B、BECN1、SQSTM1及其对应的自噬蛋白LC3、Beclin1、P62的表达情况。IHC结果显示自噬相关蛋白在OPA病肺组织和对照组中的定位表达情况十分相似。在对照组中,LC3、Beclin1、P62主要表达于细支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞中;在OPA病肺组织中,LC3、Beclin1、P62主要表达于肿瘤化增生的细支气管上皮细胞、增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞和浸润的巨噬细胞中。qPCR结果显示OPA病肺组织中MAP1LC3B基因表达量极显著高于对照组(P<0.01),BECN1基因表达量显著高于对照组(P<0.05),而SQSTM1基因表达量则极显著低于对照组(P<0.01)。WB结果显示OPA病肺组织中LC3和Beclin1的表达量均显著高于对照组(P<0.05),而P62的表达量则极显著低于对照组(P<0.01)。以上结果均表明自然感染OPA的羔羊早期病肺组织中自噬水平显著高于健康羔羊肺组织,提示当病毒入侵机体时机体为了抵抗病毒带来的伤害并维持内环境的稳态,细胞自噬水平升高。本试验为深入探讨自噬在OPA发生发展过程中的作用提供了理论依据。