鸭疫里默氏杆菌获铁系统的初步研究

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鸭疫里默氏杆菌病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)引起的,在肉鸭中较常见,以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎为病理变化,是目前产生危害最大的细菌性疾病之一。研究表明,细菌的获铁系统在其感染宿主及致病过程中起着重要的作用。为了解鸭疫里默氏杆菌的获铁系统开展了本研究。本研究采用铁离子螯合剂(DIP)来螯合TSB培养基中的铁离子。比较在限铁TSB培养基中鸭疫里默氏杆菌在添加不同浓度的外源铁(FeSO4和FeCl3)时的细菌生长情况。结果表明,各菌株的生长完全受抑制的DIP浓度分别为100μM(HXb2、NJ-1)、150μM(Th4)、200μM(Yb2)、250μM(SX)和300μM(CH3),当添加200μM FeCl3和FeSO4作为外源铁时,除了HXb2和NJ-1菌株生长较慢以外,其他四株菌均生长较快,且发现各菌株在添加FeSO4作为外源性铁时的生长比FeCl3作为外源性铁时快。采用改良CAS法检测并比较HXb2、CH3和Yb2等菌株分泌铁载体的水平,检测发现在CAS固体平板上8株RA都产生了橙色透明晕圈,但各菌株合成铁载体的能力有差异。为进一步研究鸭疫里默氏杆菌与获铁相关的基因,本研究用试剂盒提取CH3株和HXb2株在TSB和TSB+DIP(限铁)培养菌的总RNA,进行转录组学测序分析,结果显示CH3株中31个基因的表达发生了显著变化,其中8个基因显著下降,23个基因的表达上调。而HXb2株中15个基因的表达发生了显著的变化,其中3个基因显著下降,12个基因的表达上调。通过对比发现CH3株和HXb2株在限铁培养时上调或下调的基因均不相同。综上所述,本试验在限铁TSB培养基中,添加外源铁(FeSO4和FeCl3)促进了不同菌株的生长。应用鸭疫里默氏杆菌铁载体检测的改良CAS法,各菌株分泌铁载体的水平不同且检测结果十分直观。在TSB和限铁TSB培养对CH3株和HXb2株基因的表达有影响,为研究鸭疫里默氏杆菌的获铁系统及分子致病机制奠定了基础。
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