【摘 要】
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利用含几丁质的双层平板,筛选得到一株高产几丁质酶的细菌L15-2,并经过16SrRNA同源性分析、形态特征、培养特征、生理生化特征等将其鉴定为肠杆菌科沙雷氏菌属的粘质沙雷氏菌
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利用含几丁质的双层平板,筛选得到一株高产几丁质酶的细菌L15-2,并经过16SrRNA同源性分析、形态特征、培养特征、生理生化特征等将其鉴定为肠杆菌科沙雷氏菌属的粘质沙雷氏菌.经对产酶条件的优化,确定了产酶的较适培养基:胶体几丁质1﹪,K<,2>HPO<,4>0.3﹪,KH<,2>PO<,4>0.3﹪,MgSO<,4>0.05﹪,CaCl<,2>0.05﹪,FeSO<,4>0.001﹪.对粗酶的基本性质进行了研究,酶的最适作用温度和最适pH分别是50℃和6.4.在广泛pH范围内酶的稳定性较好,60℃保存1小时残存酶活81﹪.我们从L15-2的粗酶中纯化出单一组分,已达电泳纯.其分子量为41314,初步的等电聚焦电泳并结合离子交换层析的实验过程,确定其等电点在pH8附近;该酶最适离子强度为0.01mol/L,最适作用温度和pH分别是50℃和6.6.酶活对离子强度的变化并不十分敏感,多数金属离子会抑制酶的活性.L15-2菌株几丁质酶在常温条件下,10天内仍保持较高的活力,而且L15-2菌株几丁质酶对植物病原菌有较强的抑制作用.该菌株还表现出了良好的耐盐性,在0-6﹪的NaCl的培养基中良好生长与产酶,这有利于海洋废料处理及海产品养殖业的防病治病.在耐热性、酸碱耐受性方面以及室温条件长时间保存方面,该酶也表现出了优良的稳定性.
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