甲状腺激素对大鼠脑发育期神经营养因子-3及其受体表达的影响

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目的:研究甲状腺激素(TH)对大鼠脑发育关键期海马及小脑两区域神经营养因子-3(NT-3)及其受体TrkC表达的影响,以及甲状腺激素与神经营养因子二者在调节脑发育时的相互联系,进一步探讨甲状腺激素对中枢神经系统发育的调控机制。方法:本次实验分为三组:(1)甲减组:孕鼠自E5起给予0.02%甲巯咪唑(MMI)饮水,出生仔鼠即为先天甲减鼠;(2)T4-甲亢组:仔鼠于出生当日起腹腔注射L-T4,剂量为0.4μg/g·d;(3)对照组:孕鼠采用标准饲料和饮用自来水,其仔鼠作为对照组。采用原位杂交法对NT-3及其受体TrkC的基因表达进行定性及定量的测定。应用单因素方差分析(One—Way ANOVA)和组间比较采用LSD检验进行统计处理。结果:(1)NT-3及其高亲合力受体TrkC的表达均随发育而变化,并且在空间上均有各自的分布特点。在小脑NT-3只在内颗粒层的颗粒细胞中表达,而TrkC在颗粒细胞和蒲肯野细胞中均有表达。NT-3在海马的CA1及CA2区的锥体细胞及DG区的颗粒细胞中表达,TrkC则在海马的CA1、CA2、CA3区的锥体细胞及DG区的颗粒细胞中都有表达。(2)甲减组小脑NT-3 mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比明显减少,各日龄均有统计学意义(P<0.05)。(3) T4-甲亢组在生后第10天(postnatal day,P)P10、P15、P20、P25、P30时NT-3 mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比增加,均有统计学意义(P<0.05)。(4)甲减组和T4-甲亢组小脑TrkC mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比均无明显变化,还不能认为三组间表达有差别。(5)甲减组海马各区NT-3 mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比明显减少,均有统计学意义(P<0.05)。(6) T4-甲亢组在P5、P10、P15、P20时NT-3 mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比增加,均有统计学意义(P<0.05)。(7)甲减组海马各区TrkC mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比无明显变化,不能认为与对照组有差别。(8)T4-甲亢组海马各区TrkC mRNA阳性信号表达与同日龄对照组相比,除生后第10天在CA2区有差别外其余均无明显变化。结论:本次实验证实甲减可导致小脑及海马区的NT-3mRNA表达水平降低,而TH可促进其表达。甲减及甲亢均不会影响TrkCmRNA的表达。因此我们推测甲状腺激素可能通过对神经营养因子-3的调节而不是对其受体的调节来影响脑发育。
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