论文部分内容阅读
微生物混合培养是食品发酵工业中的常见现象，也是许多发酵食品风味形成的基础。为了研究混合培养中两种丝状真菌之间的相互作用和影响，将Aspergillus oryzaeSu-16与6株黄酒麦曲真菌分别接种麸皮培养基进行固态纯种培养和两两混合培养，通过分析麸曲的α-淀粉酶活力、糖化酶活力、中性蛋白酶活力、纤维素酶活力以及麸曲的蛋白质含量、总酸、浸提液的pH值7个指标，借助SPSS16.0软件，利用Spearman相关系数分析，比较混合培养麸曲与纯培养麸曲的加合之间的差异性。结合麸曲的SDS-PAGE图谱分析和十字交叉培养法，探讨A. oryzae Su-16与6株真菌在混合培养体系中相互影响的强弱。研究结果表明A. oryzae Su-16在与黑曲霉AN-13混合培养中相互影响相对最大，且A. oryzae Su-16明显影响到黑曲霉AN-13的生理代谢而非生长分化，而微小毛霉RP-09则能显著影响到A. oryzae Su-16的分化和产孢能力。利用蛋白质双向电泳和串联质谱技术，分析A. oryzae Su-16与微小毛霉RP-09以及A. oryzae Su-16与黑曲霉AN-13在固态基质上的混合培养和纯培养条件下微生物所分泌的可溶性蛋白质的差异。在A. oryzae Su-16与微小毛霉RP-09的混合培养中，A. oryzaeSu-16的碱性蛋白酶、阿拉伯木聚糖酶表达量在混合培养时显著下调，而β-1,4-木糖苷酶、高峰淀粉酶A前体，含有几丁质结合域的未知蛋白则不表达。微小毛霉RP-09有7个差异蛋白在混合培养时不表达，两种真菌在混合培养时出现1个新蛋白点；在A. oryzaeSu-16与黑曲霉AN-13混合培养中，A. oryzae Su-16的碱性蛋白酶的蛋白表达量下调，3个蛋白表达量上调，并出现5个新蛋白，而黑曲霉AN-13有13个蛋白在混合培养时都不表达。差异蛋白分析结果反映出在混合培养体系中A. oryzae Su-16与微小毛霉RP-09以及与黑曲霉AN-13在产酶上存在着相互影响。为进一步明确混合培养体系中发挥影响作用的组分，采用透析培养技术对A. oryzaeSu-16和微小毛霉RP-09以及A.oryzae Su-16和黑曲霉AN-13的二个混合培养体系进行研究。通过在液体培养基中静置透析培养实验，研究真菌的菌丝体和胞外蛋白、小分子代谢物在混合培养中的影响强弱。黑曲霉AN-13和微小毛霉RP-09产生的小于200KDa的物质对A. oryzae Su-16的蛋白质分泌和酶活影响较弱；微小毛霉RP-09产生的小于10KDa的物质对A. oryzae Su-16的生长有一定的促进作用；黑曲霉AN-13产生的10-200KDa之间的物质即酶蛋白对A. oryzae Su-16的生长有一定的抑制作用；黑曲霉AN-13产生的小于10KDa的小分子物质对A. oryzae Su-16的生长有促进作用。