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以纳豆芽胞杆菌KX株基因组DNA为模板，采用细菌16SrRNA基因的通用引物和纳豆激酶(NK)基因特异性引物，用PCR方法分别成功扩增出纳豆芽胞杆菌16SrRNA基因的部分序列和NK基因(KX-NK)的全长序列。所克隆的16SrRNA序列全长1435bp，BLAST分析结果显示，该序列与GenBank中收录的枯草芽胞杆菌16SrRNA基因相似性最高，其中与AY601722的相似性为100％；对相关序列进行系统进化分析，结果显示纳豆芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌在进化关系上的地位最近，从分子进化水平上证实了纳豆芽胞杆菌是枯草芽胞杆菌的一个亚种。KX-NK基因序列全长1473bp，包括一个由1143bp组成的开放阅读框架，以GTG为起始密码子，编码包括信号肽、前导肽、成熟肽在内的381个氨基酸；将所克隆的基因序列分别与GenBank收录的登录号为S51909.1和D25319.1的NK基因序列比较，核苷酸序列相似性均为99.80％(1471/1473)，推导的编码氨基酸序列相似性也均为99.44％(360/362)。
根据已报道的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的基因序列设计引物，用PCR方法从Escherichiacoli216株基因组中扩增出LT基因的全序列。所克隆的基因序列全长1245bp，包括编码该毒素的A亚单位和B亚单位(LTB)的全序列，其中第801位至1175位编码B亚单位的全部共124个氨基酸。所克隆的序列与已报道的S60731基因序列相似性为99.12％，二者的B亚单位编码的核苷酸序列及编码氨基酸序列的相似性分别为98.13％和95.97％。以所克隆的LT基因为模板扩增了LTB阅读框架并亚克隆至大肠杆菌表达载体E.coliBL21(DE3)进行表达，LTB的表达量占菌体总蛋白量的22.3％。
根据所克隆的KX-NK基因序列和LTB阅读框架序列设计3对引物，用PCR方法成功地将LTB阅读框架的全序列插入KX-NK基因序列中，获得重组的纳豆激酶基因(ReNK)。对ReNK基因测序结果表明，ReNK基因序列长1208bp，其上游的498bp和下游的335bp与KX-NK基因完全一致；499bp-873bp之间为插入的完整LTB阅读框架，全长375bp，序列一致性100％，说明LTB阅读框架插入正确。LTB阅读框架插在KX-NK基因成熟肽的起始位点，LTB可在KX-NK基因调控序列的调控下表达。将ReNK基因连接到整合质粒pSG1194后，电转化法将其整合到纳豆芽胞杆菌基因组DNA并置换纳豆激酶基因，获得LTB重组的纳豆芽胞杆菌。对LTB重组纳豆芽胞杆菌培养上清进行SDS-PAGE电泳分析表明，有分子量为14kDa的蛋白质表达，western-blot分析表明该表达产物为LTB。
以重组纳豆芽胞杆菌饲喂龄黄羽肉鸡试验表明：0-4周的黄鸡饲养试验表明：LTB重组纳豆芽胞杆菌具有与纳豆芽胞杆菌同等的促生长作用，且能更好地激发鸡的免疫功能。二种菌均以106cfu/g、107cfu/g添加组对生产性能的促进作用最佳；纳豆芽胞杆菌对免疫功能的促进作用却以108cfu/g剂量组最佳，而LTB重组纳豆芽胞杆菌各剂量处理组均有此同等免疫促进作用。实验结果表明，LTB重组纳豆芽胞杆菌可作为生长促进剂和免疫增强剂在禽饲料中添加使用，106cfu/g、107cfu/g添加量对黄鸡生产性能和免疫功能均有良好的促进作用。