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目的：探讨藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO)，分别对假手术组、模型对照组、藻蓝蛋白组进行神经功能缺失评分，用TTC染色法测量脑梗死体积，用干湿重法计算脑的含水量，应用原位末端标记(TUNEL)观察脑缺血再灌注不同时间点神经元凋亡的变化。结果：(1)在大鼠脑缺血再灌注后2h应用藻蓝蛋白，能够明显改善神经功能缺失症状，脑缺血再灌注后24h，藻蓝蛋白组的Bederson神经功能评分明显低于模型对照组，且这种差异一直持续到脑缺血再灌注后48h。藻蓝蛋白还能够减少脑的梗死体积，脑缺血再灌注后48h，藻蓝蛋白组的脑梗死体积明显低于模型对照组。藻蓝蛋白还能够减轻脑水肿，使脑组织的含水量明显减少。(2)模型对照组，脑缺血再灌注后凋亡神经元主要分布于缺血周围区，随着再灌注时间的延长凋亡细胞数逐渐增加，至24h达高峰，2d开始下降，14d时仍高于假手术组。藻蓝蛋白组凋亡细胞的数量相对较少，其变化规律与模型对照组相似，同一时间点相比较，藻蓝蛋白组均显著低于模型对照组。结论：脑缺血再灌注后，缺血周围区神经元的凋亡是一个动态的渐进过程。藻蓝蛋白对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用。
目的：探讨藻蓝蛋白对大鼠局灶性脑缺血再灌注后CytCmRNA和Caspase-3mRNA表达的影响。方法：用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO)，分别对假手术组、模型对照组、藻蓝蛋白组进行神经功能缺失评分，用TTC染色法测量各层面脑梗死面积的百分比，应用原位杂交技术分别观察脑缺血再灌注不同时间点CytCmRNA和Caspase-3mRNA的表达。结果：(1)假手术组双侧半球和模型对照组非缺血侧脑组织神经元CytCmRNA均有微弱表达。模型对照组缺血侧脑组织神经元CytCmRNA表达增强，主要位于皮层区和纹状体区。在皮层区和纹状体区，脑缺血再灌注后6h神经细胞即出现CytCmRNA表达，随着再灌注时间的延长逐渐增强，在皮层区于12h达高峰，而在纹状体区于24h达高峰，达高峰后表达均逐渐减弱，至14d仍高于假手术组。藻蓝蛋白组在皮层区和纹状体区CytCmRNA表达的变化趋势与模型对照组相似，但同一时间点相比，明显低于模型对照组。(2)假手术组和模型对照组非缺血侧脑组织可见到少量Caspase-3mRNA阳性细胞。模型对照组，缺血再灌注6h后Caspase-3mRNA阳性细胞数开始增加，至再灌注24h达高峰，2d后阳性细胞逐渐减少，至14d时仍有表达，略高于假手术组，各相邻时间点比较差异显著。藻蓝蛋白组Caspase-3阳性细胞的数量相对较少，其变化规律与模型对照组相似，同一时间点相比，藻蓝蛋白组Caspase-3阳性细胞数均显著低于模型对照组。结论：脑缺血再灌注后，缺血周围区的神经元内CytCmRNA和Caspase-3mRNA均高表达，二者在局灶性脑缺血再灌注损伤中起重要作用。藻蓝蛋白对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用，藻蓝蛋白可能通过减少CytCmRNA和Caspase-3mRNA的表达这一途径来抵抗脑缺血再灌注损伤。
目的：探讨藻蓝蛋白对大鼠局灶性脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9表达的影响。方法：用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO)，分别对假手术组、模型对照组、藻蓝蛋白组进行脑含水量及EB含量的测定，用免疫组化技术分别观察脑缺血再灌注后不同时间点MMP-2和MMP-9的表达。结果：(1)脑缺血再灌注后6h就可出现脑含水量增加，至2d达高峰，随后开始下降，14d时基本回到正常水平。应用藻蓝蛋白后脑含水量明显减少。(2)脑缺血再灌注后6hEB含量就开始增加，然后呈下降趋势，降至24h以后又增高，至2d时达高峰，随后再逐渐下降，至14d时，脑EB含量明显减少，与假手术组相比无显著性差异。应用藻蓝蛋白后脑组织EB的含量降低。(3)假手术组和模型对照组非缺血侧脑组织只有少量MMP-2阳性细胞。模型对照组缺血侧脑组织MMP-2阳性细胞主要位于缺血区与周边区。再灌注后24h可见MMP-2阳性细胞开始出现，3d～7d时阳性细胞数达高峰，至14d时仍有表达，略高于假手术组。藻蓝蛋白组的MMP-2阳性细胞的分布区域与模型对照组相同，其动态变化趋势与模型对照组相似，但同一时间点相比，明显低于模型对照组。(4)假手术组和模型对照组非缺血侧脑组织可见到少量MMP-9阳性细胞。模型对照组缺血侧脑组织MMP-9阳性细胞也主要位于缺血区与周边区。缺血再灌注后6h缺血区内MMP-9阳性细胞开始出现，12h明显增高，至2d达高峰，3d后阳性细胞数开始减少，至14d时恢复到基础水平，各相邻时间点比较差异显著。藻蓝蛋白组的MMP-9阳性细胞的分布区域与模型对照组相同，其动态变化趋势与模型对照组相似，但同一时间点相比，明显低于模型对照组。结论：脑缺血再灌注后，病变区MMP-2和MMP-9表达增加，二者在脑缺血再灌注后脑水肿方面起重要作用。藻蓝蛋白可能通过影响MMP-2和MMP-9的表达这一途径来减轻脑水肿，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。
目的：探讨藻蓝蛋白对大鼠局灶性脑缺血再灌注后COX-2及COX-2mRNA表达的影响。方法：用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO)，分别对假手术组、模型对照组、藻蓝蛋白组进行神经功能缺失评分，用TTC染色法测量脑梗塞体积，应用免疫组化和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌注后不同时间点COX-2及COX-2mRNA在神经元中的表达情况。结果：(1)假手术组和模型对照组非缺血侧脑组织可见到少量COX-2阳性细胞。模型对照组COX-2阳性细胞主要位于缺血周围区，而缺血中心区仅有少量阳性细胞出现，缺血再灌注后6hCOX-2阳性细胞数开始增加，至再灌注24h达高峰，2d后阳性细胞逐渐减少，至14d时仍有表达，略高于假手术组。藻蓝蛋白组COX-2阳性细胞也主要位于缺血周围区，阳性细胞数量相对较少，其变化规律与模型对照组相似，同一时间点相比较，藻蓝蛋白组周围区COX-2阳性细胞数均显著低于模型对照组。(2)假手术组和模型对照组非缺血侧脑组织可见到少量COX-2mRNA的表达。模型对照组COX-2mRNA阳性细胞主要位于缺血周围区，而缺血中心区阳性细胞明显减少。缺血再灌注6h后COX-2mRNA阳性细胞数逐渐增加，至再灌注12h达高峰，持续24h～3d，然后开始下降，至14d时仍有表达，略高于假手术组；藻蓝蛋白组COX-2mRNA阳性细胞数量相对较少，其变化规律与模型对照组相似，与模型对照组同一时间点相比，具有显著性差异。结论：脑缺血再灌注后，缺血周围区的神经元内COX-2及COX-2mRNA均高表达，其在局灶性脑缺血再灌注损伤中起重要作用。藻蓝蛋白可能通过选择性抑制COX-2及COX-2mRNA的表达这一途径来抵抗脑缺血损伤，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。
目的：观察藻蓝蛋白对缺氧/复氧后PC12细胞的活性及线粒体膜电位的影响。方法：将培养好的PC12细胞制成缺氧/复氧模型，分为未缺氧组、模型对照组和藻蓝蛋白组。用MTT比色法检测PC12细胞的OD值，观察细胞的活性及数量的变化；用共聚焦显微镜测定被Rhodamine123标记的PC12细胞内的荧光强度，观察线粒体膜电位的变化。结果：(1)缺氧/复氧后模型对照组和藻蓝蛋白组的任意时间点的OD值均明显低于未缺氧组；藻蓝蛋白组各时间点的OD值与模型对照组的同一时间点相比明显增高，具有显著性差异；藻蓝蛋白组和模型对照组，随着复氧后培养时间的延长，OD值逐渐增加，各组间相邻时间点相比，具有明显差异。(2)缺氧/复氧后模型对照组和藻蓝蛋白组的任意时间点的线粒体膜电位均低于未缺氧组。藻蓝蛋白组各时间点的线粒体膜电位与模型对照组的同一时间点相比明显增高，具有显著性差异。藻蓝蛋白组和模型对照组，随着复氧后培养时间的延长，线粒体膜电位逐渐增加，各组间相邻时间点相比具有明显差异。结论：缺氧/复氧后PC12细胞的活性及线粒体膜电位降低，并持续一段时间，用藻蓝蛋白预处理可增加细胞的活性和存活数量，同时缩短线粒体膜电位降低的时间。