【摘 要】
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研究背景与目的:乳腺癌是当今全球女性最常见的恶性肿瘤之一。在我国其发病率也早已跃居女性各种女性肿瘤之首,并且仍在不断地升高。虽然在过去的十多年时间里,乳腺癌的诊断与治
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研究背景与目的:乳腺癌是当今全球女性最常见的恶性肿瘤之一。在我国其发病率也早已跃居女性各种女性肿瘤之首,并且仍在不断地升高。虽然在过去的十多年时间里,乳腺癌的诊断与治疗水平都有了很大的提高,但治疗有效率和总体生存率尚不能令人完全满意。仍然需要更多的有利于乳腺癌的诊断和预后判断的指标来帮助临床决策的制定。越来越多的研究显示,锌指转录因子可以作为潜在的癌基因或者抑癌基因参与肿瘤进程,其中就包括了ZIC2。但其在乳腺癌中的研究甚少,本文旨在探讨锌指转录因子ZIC2在乳腺癌病理演化过程中所扮演的角色及ZIC2成为标记乳腺癌预后的潜在的生物标志物的可能性。 研究方法: 1.采用定量PCR和免疫印迹方法分别在mRNA和蛋白水平上检测ZIC2在乳腺癌系列细胞株及临床组织标本中的表达情况。 2.收集2001年1月到2013年1月期间于中山大学附属肿瘤医院就诊的173例乳腺癌患者的石蜡组织切片及完整的临床资料。采用免疫组化方法,检测ZIC2在乳腺癌组织及对应的癌旁组织的表达情况。利用多重回归分析方法,寻找ZIC2表达水平与乳腺癌患者临床参数之间的关系。采用生存分析确定ZIC2的表达水平对预后的影响。 3.构建ZIC2质粒在乳腺癌细胞株中过表达ZIC2;构建ZIC2的siRNA序列,在乳腺癌细胞株中低表达ZIC2,分别采用MTT、平板克隆形成实验、观察ZIC2不同表达状态下对乳腺癌细胞增殖速度、克隆形成能力的影响。 研究结果: 1. ZIC2的mRNA和蛋白在乳腺癌细胞株表达下调。 2.免疫组化结果表明与癌旁组织相比,ZIC2的表达水平在乳腺癌组织中呈现低表达。 3.统计学分析表明ZIC2的表达水平与肿瘤的大小、淋巴结受累情况及有无远处转移存在显著的相关性;另外在乳腺癌患者中,ZIC2表达高者其总生存时间比表达低者长。且在ER阳性、HER-2阴性、肿瘤直径大于2cm、没有淋巴结转移,II/III/IV期的乳腺癌患者中,ZIC2的表达高低与总生存时间有关,表达高者其总生存时间较长,表达低者总生存时间较短。 4.多因素Cox回归分析显示,ZIC2是乳腺癌的一个独立的潜在的预后因子。 5.在乳腺癌细胞株中过表达ZIC2能够抑制乳腺癌细胞的增殖速度和克隆形成。相反沉默ZIC2能促进乳腺癌细胞的增殖速度和克隆形成。 研究结论:研究结果提示ZIC2在乳腺癌中可能扮演抑癌基因的角色,可以作为乳腺癌潜在的预后标志物。
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