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本文主要研究全氟化合物的两种代表性化合物全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)和全氟辛酸(perfluorooctane acid,PFOA)对三种人类肿瘤细胞的急性毒性效应,以及PFOS对人类乳腺癌细胞ZR75-1错配修复活性的干扰效应。
实验方法:
细胞毒性实验采用MTT实验法,检测了PFOS和PFOA这两种药物对人类乳腺癌细胞系ZR75-1结肠癌细胞系HCT116和宫颈癌细胞系HeLa的1~6d急性毒性效应;PFOS药物浓度梯度为50、75、100、125、150、200μM;PFOA药物浓度梯度为50、100、150、200、250、300μM。设置PFOS药物浓度梯度为1、5、25μM对细胞暴毒120h后,共转染同/异源EGFP dsDNA和RFP,然后荧光显微镜拍照,并用刘使细胞仪计数,由公式相对EGFP表达量=(M·IM-N·IN)/(C·IC-N·IN)(式中M:异质双链质粒转染产物中绿色细胞的百分比; N:阴性对照组转染产物中绿色细胞的百分比;C:同质双链质粒转染产物中绿色细胞的百分比;IM:M中阳性细胞的平均荧光强度;IN:N中阳性细胞的平均荧光强度;IC:C中阳性细胞的平均荧光强度。并以相对EGFP表达量来指示细胞DNAMMR活性。
结果:
细胞急性毒性实验表明PFOS和PFOA对三种人类肿瘤细胞都有明显的增殖抑制效应。且一般PFOS比PFOA的毒性大。且HCT116:PFOS对细胞有明显抑制作用,并随浓度增加而加强,各浓度间均有显著差异,表现出明显的剂量依赖效应。在200μM时,PFOS对细胞的增殖抑制最明显。PFOA对细胞增殖也有明显抑制作用,并随浓度增加而加强,各浓度间均有显著差异。且ZR75-1细胞在PFOS(75-200μM)和PFOA(100-300μM)的毒性作用下,死亡率都高于其他两种细胞。检测PFOS对ZR75-1细胞DNA MMR活性干扰实验中,暴毒组1、5μM的相对EGFP表达量都高于对照组,而25μM组的相对EGFP表达量却是最低的。没有规律性。
结论:
全氟化合物PFOS和PFOA对人类三种肿瘤细胞HCT-116、Hela和ZR75-1都有增殖抑制效应,抑制的程度应与时间、剂量有关。人类乳腺癌细胞ZR75-1经1μM、5μM的PFOS作用后,相对EGFP表达量高于对照组,而在25μM作用下的表达量却低于对照组,是三组中最低的。不能确定PFOS是否直接作用于DNAMMR。