肿瘤抑制基因RASSF1A、p16甲基化与人宫颈癌HeLa细胞凋亡相关性的研究

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目的:检测人宫颈癌Hela 细胞中RASSF1A、p16 基因甲基化的状况,研究在人宫颈癌Hela 细胞凋亡过程中RASSF1A,p16 基因甲基化的变化情况,探讨肿瘤细胞凋亡与抑癌基因甲基化的相关性,并寻找新的去甲基化药物。 方法: 1)应用甲基化特异性PCR 法(Methylation-specific PCR,MSP)检测人宫颈癌HeLa 细胞及其凋亡过程中RASSF1A,p16 基因启动子区5’CpG 岛的甲基化状况。2)应用天花粉蛋白诱导HeLa 细胞凋亡构建凋亡模型, 对其进行细胞形态学观察, MTT 法检测天花粉蛋白对HeLa 细胞增殖抑制的影响,流式细胞仪检测天花粉蛋白对HeLa 细胞的诱导凋亡作用. 结果: 1)肿瘤抑制基因RASSF1A, p16 在人宫颈癌Hela 细胞异常甲基化。2)经天花粉蛋白处理(20ug/ml,48 小时)后,HeLa 细胞生长明显受抑,流式细胞仪直方图出现明显的亚二倍体峰,RASSF1A,p16 基因启动子区5’CpG 岛无异常甲基化表现。 结论: 1) 肿瘤抑制基因RASSF1A,p16 基因启动子区甲基化在人宫颈癌癌变过程中可能是一种比较重要的分子调控机制。2)人宫颈癌HeLa 细胞凋亡与肿瘤抑制基因RASSF1A,p16 的去甲基化可能有某些密切的相关性。3)天花粉蛋白对肿瘤抑制基因RASSF1A,p16 有一定的去甲基化作用,可能是新型的去甲基化药物。
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