药用大黄茎叶化学成分及提取物的研究

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目的:大黄地上部分在民间被使用的记录很多。药用大黄作为川产道地药材,主产于四川阿坝州,即是五一二汶川地震灾区,其地上生物资源若能得到很好的开发利用,不仅对于保护环境、节约资源有重要意义,还可以促进灾区的生态发展、提高灾区人民的经济利益。本研究通过对药用大黄茎叶化学成分初步研究,优化大孔吸附树脂对大黄地上部位总蒽醌类物质的纯化工艺以确定最佳工艺参数,研究药用大黄地上部位提取物的泻下、抗炎、抗氧化作用,以便找到药用大黄茎叶提取物可以作为药用大黄药材替代资源的切实证据,扩大药源,充分开发利用生物资源、保护生态环境,为药用大黄地上部分的开发利用奠定基础。方法:在多番查阅资料以及具体实验后,发现大黄地上部分中,茎和叶的葸醌含量相对接近,且生物量占地上部分资源的绝大多数,考虑到对资源的最大利用,故决定将茎叶合在一起研究。研究总体思路是首先对比4种大孔树脂对大黄茎叶总蒽醌的吸附性能,以总葸醌为考察指标,采用紫外分光光度法测定总葸醌的含量,对大孔树脂富集、纯化大黄茎叶总蒽醌的条件进行筛选。其次分别采用急性致泻、碳末法以及自身粪便实热模型,观察药用大黄茎叶提取物对正常小鼠以及实热模型小鼠排便情况的影响;采用耳肿胀法以及棉球肉芽肿模型,观察药用大黄地上部位提取物对小鼠炎症的影响;采用有机自由基以及羟基自由基,观察药用大黄地上部位提取物的抗氧化作用活性。最后采用柱层析方法对大黄茎叶乙酸乙酯部位成分进行分离,获得单体化合物。结果:(1)D101型大孔树脂对药用大黄茎叶总葸醌有良好的吸附和解析性能。其最佳上柱工艺为:最大上样量为4.54g/g(生药材/干树脂),pH为7,流速为1ml/min,药液浓度为含生药量2.16g/ml;加样吸附均匀后,以5倍量树脂柱体积冲洗至流出液几乎无色,改用10%的乙醇再冲洗至流出液无色,用0.4mol/L NaOH与75%乙醇按体积比1:5混合,用量为10倍量树脂柱体积,药用大黄茎叶总蒽醌的含量提高到15.25%。(2)药用大黄茎叶提取物可在一定程度上导致小鼠腹泻,缩短正常及实热模型小鼠首次排黑便时间并且增加排便数量,并且可在一定程度上抑制炎症反应,此外对有机自由基及羟基自由基也具有一定的抑制作用。(3)从药用大黄茎叶酸乙酯部位分离得到两个单体化合物,经理化常数测定和1H-NMR、13C-NMR图谱分析,结构鉴定为没食子酸乙酯和槲皮素。结论:D101型大孔吸附树脂对药用大黄茎叶总蒽酯具有较强的富集作用,采用本法富集纯化大黄地上部位总蒽醌的方法可行。药用大黄茎叶提取物具有一定的泻下、抗炎及抗氧化作用,其中抗炎效果优于地下部位。通过对药用大黄茎叶提取物的研究,寻找有可能作为大黄替代资源的证据,为进一步扩大大黄资源的开发利用尊定了基础。
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