蓖麻毒素(RicinToxinRT)存在于大戟科植物蓖麻籽中，主要是蓖麻碱、蓖麻毒蛋白(Ricin)及过敏性物质，Ricin是强细胞毒蛋白，对肿瘤细胞半数杀伤的浓度--IC60在10-12molL左右。Ridcin分子由A，B二条肽链构成，通过一对二硫键相连。A链(RicinToxinAChain，RTA)是活性链具有毒性，能使核糖体失活，抑制蛋白质的合成，使细胞死亡。但是单一的RTA无法进入细胞，无毒或毒性有限；B链(RicinToxinBChaimRTB)对细胞没有毒性，其功能是帮助RTA进入细胞。胁cin应用于临床肿瘤治疗的研究和应用由来已久。 为了避免Ricin的高毒性，发挥它在肿瘤治疗中的作用，设想将RTA和RTB分开，将蓖麻毒蛋白B链基因插入El基因缺失腺病毒中，利用病毒作为载体在肿瘤灶局部表达RTB蛋白，然后再注射入RTA，由于RTA与RTB具有很强的亲和性(0lsnesetaL.2001)，RTA将向肿瘤灶局部富集，并在RTB的帮助下进入细胞，发挥RTA的细胞毒作用，杀伤细胞。同时，杀伤的细胞会释放RTA／RTB复合体，产生一定的旁观者效应，杀伤周围细胞。 为了验证这一设想的可行性，本研究用原核表达系统融合表达带有His和Trx标签的RTA，分离制备了有生物活性的可溶性RTA蛋白，并且构建了表达RTB的重组腺病毒载体，能在目的细胞中表达RTB蛋白。用表达RTB的重组病毒感染HEK293、№la、Smmc7721、HL7702等细胞，然后加入纯化的RTA蛋白，发现细胞生长受到明显的抑制，大量细胞死亡。不表达RTB的对照腺病毒比较感染细胞后加入RTA蛋白，细胞则基本没有受到影响。同时处理细胞的上清液对正常细胞有明显的杀伤作用，提示产生了RTA／RTB复合体，具有一定的旁观者效应。 这些结果在细胞培养系统中初步证实上述设想的可行性，为进一步的动物实验，和在此基础上构建特异性表达RTB的载体系统提供了基础，为人类肿瘤基因治疗做了一些有意义的探索。