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罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)隶属于节肢动物门,甲壳纲,十足目,长臂虾科,沼虾属,原产东南亚,但已被引种到世界许多地区,是一种养殖范围很广的淡水经济虾类。罗氏沼虾自1976年引进中国大陆以来,由于其肉味鲜美,营养丰富等特点,深受广大消费者的喜爱,已成为淡水养殖的重要产品。但由于目前我国的罗氏沼虾生产几乎都是人工集约化养殖,而实践表明,长期集约化养殖极易引起性成熟提前,个体偏小,抗逆性差等问题。因此我们运用细胞工程技术,进行了罗氏沼虾多倍体诱导的研究,因为多倍体生物一般具有生长快,个体大,肉质好和成活率高等优点。我们首先对罗氏沼虾卵子极体排出时间和第一次卵裂时间进行了研究,又对正常二倍体罗氏沼虾胚胎的染色体数目进行了计数,在此基础上,采用热休克和细胞松弛素B两种方法成功地诱导出了罗氏沼虾四倍体。 1.罗氏沼虾极体排出时间和第一次卵裂时间的确定 通过石蜡切片观察到,当罗氏沼虾卵子完全成熟时,第一极体己经排出。第二极体排出的时间约在授精后55分钟。经过雌性原核和雄性原核的形成、结合,第一次卵裂的时间约在授精后210—230分钟。 2.罗氏沼虾正常二倍体胚胎染色体数目的确定 对正常二倍体罗氏沼虾囊胚期和原肠期的胚胎细胞进行染色体统计,发现其二倍体染色体数目为2n=118。 3.热休克诱导罗氏沼虾四倍体 K迄囱飞 硕士学位论文 AH;-y.y‘.”‘吓RSury\一 热休克诱导罗氏沼虾四倍体的最好条件是:在受精后 ZIO分钟时,用 40”“““”Wf””’““”“””’““”“”到乃’肪””””””“4.细胞松弛素B诱导罗氏沼虾四倍体 细胞松弛素B诱导罗氏沼虾四倍体的最好条件是:在受精后230分钟,用l·0 mg/L的 CB处理埂瞻m分钟,此时最高的四倍体诱导率为 33·78%。