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自然灾害,战争,手术和交通事故等是造成人体出血的主要原因。近几年,生物止血材料在止血方面显示出巨大的潜力,在止血速度和功能上都取得了较大的突破,但还存在一些不足,需改进提高。多孔淀粉具有低毒性,可生物降解,亲水性和吸收性等优良特性,因而应用于止血材料备受关注。此外,壳聚糖也具有生物相容性好,可生物降解,无毒性,抗菌和止血等多种优异的生物学性质。因此,将两种止血材料复合,在止血性能方面会有潜在的优势,为了研究高效、安全、廉价的新型止血剂,本实验以多孔淀粉和壳聚糖为原料,进行了以下实验:以玉米淀粉为原料,通过超声酶解法制备多孔淀粉(PS),在液体体积与玉米淀粉质量比为6∶1;糖化酶和淀粉酶的质量比例为3∶2;超声功率为550 W;酶解时间为10 h;酶用量为5%的时候,得到的多孔淀粉性能最佳,吸水率为120.49%,膨胀率为212.58%。该条件下制备的多孔淀粉以三偏磷酸钠(STMP)为交联剂,在多孔淀粉与液体体积比为30%、反应温度55℃~60℃、交联剂与淀粉的质量比为0.04:1、反应体系pH值9.0、交联时间50~60 min的时候,得到交联多孔淀粉(SPS)的吸水率为154.33%,膨胀率为239.14%。通过盐酸法降解壳聚糖(CS),将降解后的壳聚糖(分子量100-110 KDa)与多孔淀粉通过三偏磷酸钠交联,并通过单因素实验考察。在单因素试验的基础上以固液比(10.0%,12.5%,15.0%)、多孔淀粉和壳聚糖质量比(1∶1,2∶1,3∶1)、STMP与多孔淀粉壳聚糖总质量的质量比(6%,8%,10%)为自变量,以吸水率为响应值,进行响应面优化。确定最佳工艺条件为:固液比12.5%、多孔淀粉与壳聚糖的质量比为2∶1、STMP与多孔淀粉、壳聚糖质量之和的比为8.0%。此条件下进行三次平行实验,结合率为71.30%,平均吸水率为145.6%。用扫描电子显微镜(SEM)观察多孔淀粉和交联多孔淀粉颗粒,表面都布满孔隙,交联多孔淀粉-壳聚糖(SPC)表面覆盖着大量壳聚糖。傅里叶红外光谱(FT IR)扫描表明,和原淀粉相比,PS和SPS的红外谱图中没有新的吸收峰产生,SPC中出现壳聚糖的特征吸收峰。X单晶衍射扫描(XRD)表明多孔淀粉的交联以及多孔淀粉和壳聚糖的交联都是发生在淀粉的结晶区。以体重200-220 g、雄性SD大鼠为实验鼠,在全血凝固动力学实验中,相同时间内和PS、SPS相比,SPC能形成更大的血凝块;在与红细胞相互作用实验中,和PS、SPS相比,SPC表面能吸附更多的红细胞,而且这种吸附是成簇的、聚集的;在SPC与枸橼酸钠抗凝血相互作用时发现其表面大量的血细胞被吸附,甚至有少量的血小板伪足突起产生;我们得出结论SPC的止血机理是多孔淀粉与壳聚糖的协同止血作用。在大鼠断尾和肝损伤实验中,交联多孔淀粉-壳聚糖止血时间最短,仅为164.42 s(1 cm断尾)、147.25 s(2 cm断尾)、145.20 s(肝损伤),表现出更好的止血效果。