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目的:采用豚鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)由大鼠外周静脉注射并结合胸腺修饰的方法预处理受体。在豚鼠到大鼠腹腔心脏移植模型中,研究豚鼠MSCs对受体自身免疫调节以及对异种移植免疫排斥反应的影响,探索其诱导受体大鼠产生免疫耐受的可能,进而揭示其机理。方法:取豚鼠MSCs进行分离纯化体外扩增至第三代,然后对大鼠行胸腺修饰并在术前通过受体大鼠颈静脉行外周移植。供体豚鼠和受体SD大鼠各35只随机分成七组,A组(空白组):仅行豚鼠到大鼠腹腔心脏移植;B组(CVF组):移植前受体24小时腹腔注射中华眼镜蛇毒因子(CVF) 40u/kg(即0.4mg/kg),手术前下腔静脉注射CVF 60u/kg;C组(CVF + IT组):MSCs在受体大鼠胸腺修饰后二周行豚鼠到大鼠异位异种腹腔心脏移植,其他处理同B组; D组(CVF + IV组):MSCs经受体大鼠颈内静脉移植一周后行心脏移植,其他处理同B组;E组(CVF + IT + IV组):受体大鼠行胸腺修饰和MSCs外周移植后行心脏移植, MSCs外周移植于术前一周进行,其他处理同B组;F组(CVF + IT + IV + CsA组):受体大鼠在心脏移植术前一周开始每日由腹腔内注射CsA 10mg/Kg,连续7天,其他处理同E组;G组(CVF +条件培养液移植组):豚鼠MSCs条件培养液经受体大鼠颈内静脉移植三天后行心脏移植,其他处理同B组。观测指标:移植心脏的存活时间、病理改变,受体大鼠CCR5变化、ICAM-1的变化、供受体淋巴细胞毒性试验等。结果:①病理:供心停跳时A组心脏病理表现均呈典型HAR表现,其他各组表现为DXR。②供心平均存活时间(MST):A组26.8±4.4分钟,B组41±1.25分钟,C组89.4±8.8分钟,D组73.6±12.2分钟,E组100.2±6.8分钟,F组103.4±10.3分钟,G组44.8±4.9分钟。C组和D组平均存活时间延长较A、B明显延长P<0.05,E组和F组平均存活时间延长也较C、D明显延长P<0.05,但E组和F组无显著统计学差异,P>0.05。③受体外周血CCR5检测结果(pg/ml):A组(空白组):6.76±0.22; B组(CVF组):4.82±0.25; C组(CVF+IT组):2.34±0.84;D组(CVF+IV组):2.88±0.57; E组(CVF+IT+IV组):1.1±0.32; F组(CVF+IT+IV+CsA组):1.14±0.23; G组(CVF+条件培养液移植组):4.08±0.78。C、D两组CCR5检测结果无显著性差异P>0.05,E、F两组CCR5检测结果也无显著性差异P>0.05,但E组与C组检测结果有显著性差异P<0.05,但E组与D组检测结果也有显著性差异P<0.05。结论:1、MSCs外周中枢联合预处理受体SD大鼠的方法,能够升高SD大鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞水平,调节受体自身T细胞,从而延长移植物存活时间。2、MSCs外周中枢联合预处理的受体SD大鼠,体内CCR5、ICAM-1水平降低,IL-2、IFN-γ等因子分泌受抑制,Th1的激活减少,Th1/Th2比例降低,有利于免疫耐受的形成。3、在豚鼠到大鼠心脏移植模型中,采用MSCs外周中枢联合预处理对延长移植物存活时间具有协同增强效应,但不能完全克服急性血管性排斥反应(AVR)的发生。