【摘 要】
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血管栓塞性疾病是临床上死亡率较高的疾病之一,研发安全、高效的溶血栓药物一直是医药科技行业关注的热点。医学中溶栓疗法是这类疾病主要的治疗方法,目前上市的溶栓药物或多
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血管栓塞性疾病是临床上死亡率较高的疾病之一,研发安全、高效的溶血栓药物一直是医药科技行业关注的热点。医学中溶栓疗法是这类疾病主要的治疗方法,目前上市的溶栓药物或多或少都存在一些不足,研发新型的溶血栓药物迫在眉睫。
本课题利用单因素实验和正交分析的方法,比较系统的优化了纤溶菌固态发酵条件,并对产出的纤溶酶进行了初步的分离纯化:
1、HL1芽孢杆菌产纤溶酶的最适固态发酵条件是:面粉∶大豆(质量比)=1∶8,培养基加水量最适值0.75mL/g物料,培养基就用初始pH;优化培养条件为:接种量2mL/100g物料,通气量为18g/250mL三角瓶,NaCl0.2mg/kg,CaCl20.1 mg/kg,MgCl20.3 mg/kg,培养时间为60h,温度37℃。采用优化条件培养,纤溶酶产量平均达684.26尿激酶单位/g物料。
2、纤溶酶的纯化可以采取70％饱和度的硫酸铵分级盐析,超滤脱盐工作压力为0.11MPa。经过硫酸铵分级盐析、超滤脱盐、Sephadex G-100柱层析、冷冻干燥后,得到冻干酶粉的比活力为639.9 U/mg,活性回收率74.35％。
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