儿童支气管哮喘免疫耐受的研究

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第一部分:长期吸入过敏原对哮喘小鼠气道炎症及重塑的影响目的探讨长期吸入过敏原对哮喘小鼠气道炎症及重塑的影响。方法健康雌性昆明系小鼠32只随机分为四组,每组8只,正常对照组(A)、哮喘组组(B)、短时间持续雾化吸入过敏原组(C)、长时间持续雾化吸入过敏原组(D)。B、C、D组小鼠采用卵清白蛋白致敏建立哮喘小鼠模型,模型建立后,根据需要使C、D组小鼠分别吸入2W、4W的过敏原,观察肺组织病理变化与支气管肺泡灌洗液(BLAF)中细胞学变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中OVA-IgE水平,免疫组化测定肺组织中MMP-9、TIMP-1和GATA-3。结果①A组无喘息症状及炎性病理改变,B、C、D组喘息症状及肺病理的炎症表现较A组明显加重,B、C组气管周围以炎症细胞浸润显著,D组则以气道管壁增厚表现突出;②B、C、D组BLAF细胞总数,嗜酸性粒细胞、吞噬细胞、淋巴细胞比例均高于A组,差异有显著性(P<0.01),同时B、D组低于C组,差异亦有显著性(P<0.01);③B、C、D组血清中OVA-IgE水平与A组相比均显著升高,差异皆有显著性(P<0.01),同时B、D组低于C组,差异亦有显著性(P<0.01);④B、C、D组肺组织中MMP-9、TIMP-1较A组均升高,差异有显著性(P<0.01),且D组高于B、C组,C组高于B组,差异皆有显著性;⑤B、C、D组肺组织中GATA-3较A组均升高,差异有显著性(P<0.01),且B、D组低于C组,差异亦显著性;上述所有指标B、D组之间除MMP-9、TIMP-1外均无差异。⑥肺组织表达GATA-3水平与血清特异性OVA-IgE、BALF中EOS计数呈显著正相关,(r=0.94,P<0.01;r=0.96,P<0.01)。结论支气管哮喘小鼠气道炎症与气道重塑并存,早期气道以炎症表现为主,而后期则以重塑为主要表现。提示哮喘早期治疗的重要性。第二部分:尘螨标准化变应原对儿童哮喘治疗作用的临床研究目的探讨尘螨标准化变应原对哮喘儿童特异性免疫治疗(SIT)的效果和安全性。方法采用皮肤点刺试验进行过敏原测定。对其中53例屋尘螨及粉尘螨过敏的患儿采用丹麦ALK-ABELLO公司提供的屋尘螨及粉尘螨标准化变应原进行特异性免疫治疗,治疗过程中通过观察不同时期激素吸入量、肺功能的变化和哮喘症状评分确定SIT的效果,分析注射过程中的不良反应确定其安全性,做好护理工作。另选择87例患儿为对照组,对照组患儿从哮喘中心登记资料中随机抽取,两组年龄、性别、病情程度无显著性差异。除特异性免疫治疗外,两组患儿的对症治疗、宣教指导方案相同。结果哮喘患儿吸入激素剂量逐步减量,并于治疗后37周开始SIT组激素吸入量较对照组低(P<0.01),肺功能指标逐步改善,于治疗51周开始SIT组PEF(用力呼气峰流速)较对照组提高(P<0.05),而FEV1(第一秒用力呼气量)两组比较差别无显著性(P>0.05),哮喘症状得以控制。治疗初期以及第15、21、37周和51周时两组患儿自我症状评分差别无显著性(p>0.05),但随着时间的延长,与治疗后的2年和3年,两组患儿的评分差别有显著性,且SIT组较对照组明显提高。治疗过程中所有患儿无严重不良事件发生。结论采用屋尘螨及粉尘螨标准化变应原进行特异性免疫治疗作为哮喘病的病因治疗方法,可以明显减少吸入激素剂量,减少哮喘发作次数,减轻哮喘症状程度,改善肺功能,提高ACT评分且安全可靠。
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