目的:本研究的主要目的是通过检测壳聚糖和季铵盐壳聚糖(HTCC)对来自于感染根管、唾液以及标准株——粪肠球菌P25RC、P52Sa和ATCC29212的悬浮态和生物膜的抗菌效果,来评估其控制感染的能力;同时探索双蒸水(Double distilled water,DDW)和磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer solution,PBS)两种溶剂对壳聚糖及HTCC抗粪肠球菌效果的影响,对其中可能涉及的抗菌机制进行分析;评估生物安全性能,为其在未来的治疗应用中浓度的选择提供参考。方法:壳聚糖和HTCC分别由DDW和PBS进行二倍浓度梯度稀释,得到20-2500μg/ml等系列浓度溶液。不同浓度梯度的壳聚糖和HTCC溶液分别作用于粪肠球菌P25RC、P52Sa和ATCC29212,将2%NaClO作为阳性对照组,溶剂DDW和PBS作为阴性对照组。作用24 h后,采用集落形成单位检测法(Colony-forming unit assay,CFU检测)对残余菌浓度进行检测,并计算各组抑菌率以比较抗菌能力的差异。分别在盖玻片和牙本质薄片上培养粪肠球菌(菌株P25RC)生物膜,与各实验组溶液作用24 h后,于倒置荧光显微镜和扫描电镜下观察细菌活性状态和微观形态。用CCK-8试剂盒(Cell counting kit-8)评估不同梯度浓度的壳聚糖和HTCC对成骨前体细胞MC3T3-E1的细胞毒性。结果:溶于DDW的壳聚糖和HTCC的最小杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC)分别为70μg/ml和140μg/ml。对于相同浓度的壳聚糖和HTCC,溶于PBS时的抗菌效果明显低于溶于DDW时的抗菌效果(P<0.05)。78μg/ml壳聚糖(溶于DDW)对粪肠球菌生物膜抑菌率可高达94%,仅次于2%NaClO。156μg/ml HTCC(溶于DDW)抑菌率亦可达79.56%。电镜下形态学观察发现,壳聚糖和HTCC溶液均能使细胞裂解,以此产生杀菌作用。通过CCK-8细胞毒性检测发现,浓度小于625μg/ml的壳聚糖溶液对成骨前体细胞MC3T3-E1无细胞毒性,甚至具有促进细胞增殖的作用。HTCC在本实验中表现出较明显的细胞毒性。结论:壳聚糖及其衍生物HTCC对粪肠球菌的悬浮态和生物膜均具有良好的抗菌效果,可考虑应用于根管感染的治疗。另外,PBS用作溶剂时,可能通过电荷的相互作用对药物的抗菌效果产生影响,而DDW效果更好。根据细胞毒性的差异,壳聚糖与HTCC在根管充填和消毒中展现了不同的应用前景。