硒是维持人体正常生理功能的微量元素之一。补硒在癌症预防、肝脏保护、心血管调节、甲状腺激素维持等方面具有重要功能。因此,从膳食补充和生理调控出发,开发高生物量的富硒技术和产品用于人群硒营养干预意义重大。酿酒酵母具有丰富的生物酶转化系统,可以将无机硒转化为高活性的有机硒,并合成多种益生营养物质,是一种理想的硒膳食补充剂。本论文以一株酿酒酵母出发,经紫外诱变及硒盐胁迫筛选得到的酿酒酵母菌株MY-02作为实验菌株,在混合硒源条件下制备高生物量的富硒酵母,并探讨了该菌株硒富集性能改善的生理和分子机制,以期为后续的富硒酵母特异性强化和应用研究提供可行参考。本文的主要研究内容和结论可概述如下:（1）以一株酿酒酵母CICC 31105作为出发菌株,通过多次紫外辐照诱变和抗性平板筛选,获得了一株高性能的富硒菌株MY-02。确定该诱变株的最优发酵工艺:亚硒酸钠添加浓度为35 mg/L、添加时间为第8 h、摇瓶发酵时间为30 h。在此条件下,菌株具有较高的富硒水平,其硒含量可达3129.40±50.12μg/g,生物量可达6.37±0.21 g/L,硒含量比出发菌株提高2倍。（2）基于离子通路调控,通过复配硒源优化MY-02菌株的富硒性能,探究了酵母富硒强化的相关生理机制。利用标准化的硒产量值平衡酵母生物量和硒含量,确定当亚硒酸钾和亚硒酸钠的添加比例为2:1时,酵母表现出优势的硒富集和转化能力,并在生长趋势和胞外p H水平上分析了菌株的生长特性。通过扫描电镜、透射电镜、能谱扫描和傅里叶红外光谱等表征技术观察了酵母硒富集过程中的形态变化和硒元素分布规律。通过测定硒代谢中的关键限速酶（硒磷酸合成酶）的活性,发现混合硒源处理可显著提高酶活,解释了富硒性能改善的生理机制。（3）通过转录组测序技术测定了不同硒源处理条件下酵母菌株的转录组序列差异,探究了酵母富硒强化的相关基因表达分子机制。功能注释分析结果表明,硒盐添加会上调与胞外硒转运和胞内硒转化相关的基因组,这些基因主要集中在氨基酸代谢、还原型辅酶Ⅱ代谢等生物过程中。基于钾钠离子调控的复配硒源培养可以上调硒转运相关的磷酸盐转运蛋白家族的相关基因,刺激硒代谢通路中的谷胱甘肽的合成通路,从而提高菌株的富硒性能。