基于UHPLC-Q-TOF-MS技术探讨高血压病阴虚阳亢证的代谢组学特征研究

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研究目的:运用代谢组学的研究方法,探究高血压阴虚阳亢证型的代谢产物变化,比较高血压阴虚阳亢患者与健康人群的血清代谢物,寻找高血压阴虚阳亢证的潜在生物标志物,并与之前课题组中关于高血压阴阳两虚证的研究结果进行对比,寻找异同,为现代化的高血压中医辨证分型提供一定依据。研究方法:按照诊断标准及纳入标准为条件,收录高血压阴虚阳亢证型患者41例和健康对照组30例。抽取受试者空腹12小时后的静脉血,进行血常规及生化检查后收集基础数据,然后保存在-80℃的冰箱中,待样品收齐后,制备样品,通过超高效液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF/MS)分析所有受试者血清的代谢谱特征。采用多元统计方法分析获得的代谢组学数据,提取出差异代谢物。研究结果:(1)基本情况比较:两组患者性别、年龄比较均不存在统计学差异(P>0.05);血常规、血生化的部分主要指标上两组未出现显著差异(P>0.05)。(2)使用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘判别分析方法(OPLS-DA)进行数据分析,可发现高血压组与健康对照组两组血清样本的代谢物存在明显差异,38个差异代谢物被鉴定为潜在的生物标志物,找到包括显著性差异代谢物和差异代谢物在的共38种差异代谢物。显著性差异代谢物(P<0.05)为:乙酰肉碱、L-谷氨酸、L-色氨酸、芥子酸酰胺、DL-吲哚-3-乳酸、棕榈酰肉碱、神经鞘磷脂、鸟氨酸、L-焦谷氨酸、邻氨基苯甲酸、甘氨鹅脱氧胆酸钠、α-酮异戊酸、羟基十六酸、尿囊素、二十六烷酸、亚油酸的10-顺式环氧化物、十五烷酸、乙二胺四乙酸、缬草酸、鹅脱氧胆酸盐、顺式-11,14-二十碳二烯酸、羟基十二烷酸、氧代己二酸、肉豆蔻酸、牛磺酸、DL-苯基乳酸、4-羟基-3-甲基苯甲酸、L-古洛糖酸-γ-内酯、十八烯酸。差异代谢物(0.05<P<0.1)为:1-硬脂酰-SN-甘油-3-磷酰胆碱(18:0 lyso pc)、18:1溶源性卵磷脂、Thioetheramide-PC、神经酰胺、正十二烷酸、环氧油酸、丙氨酸、二羟基丙酮、L-脯氨酸。这些差异代谢物可能是高血压阴虚阳亢证的潜在生物标志物。研究结论:(1)高血压阴虚阳亢证患者与健康人群的血清代谢物确实存在差异,这对临床高血压阴虚阳亢证患者与健康人群鉴别诊断有所帮助。(2)找到包括显著性差异代谢物和差异代谢物在的共38种差异代谢物,这些差异代谢物可能是高血压阴虚阳亢证的潜在生物标志物。(3)与本课题组之前关于高血压阴阳两虚证的代谢组学研究结果相比,相同的差异代谢物是色氨酸。而乙酰肉碱、鸟氨酸、神经鞘磷脂、甘氨鹅脱氧胆酸钠等其他不同的差异代谢物,或能成为高血压病阴虚阳亢证与阴阳两虚证的鉴别点,为现代化的高血压中医辨证分型提供一定依据。
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