目的：本实验主要探讨迟缓爱德华菌（Edwardsiella tarda，简称E.tarda）eha（Edwardsiella tarda haemolysin activator gene，简称eha）基因，调控E.tarda相关毒力的作用。　　 方法：利用自杀质粒 pHM5构建重组自杀质粒，运用同源重组原理，缺失E.tarda的eha基因，并用PCR证实。再用中等拷贝的质粒pACYC184构建含eha基因的重组质粒pACYCEHA，电击导入缺失株△eha中，得到缺失株的互补株。测定野生株、突变株及互补株在限制性培养基中的生长曲线。通过平板溶血性法、接触溶血法、上清溶血法检测，观察野生株、缺失株及互补株溶血性的差异。通过E.tarda对过氧化氢的抵抗力实验，比较eha的缺失是否影响E.tarda对过氧化氢的抵抗力。利用MTT法比较野生株、缺失株及互补株细菌滤液对Vero细胞的毒性有无差别。利用RT-PCR观察eha基因是否调控E.tarda鞭毛基因Flic的转录。最后用超速酸化离心法提取E.tarda野生株和缺失株的鞭毛，再用SDS-PAGE电泳，比较eha基因是否对鞭毛蛋白的表达有调控作用。　　 结果：成功构建E.tarda的eha基因缺失株及缺失株的互补株。野生株、缺失株和互补株在限制培养基中均能正常生长。平板溶血法和接触溶血法结果显示，缺失株和互补株不溶血，而野生株溶血。H2O2抗性结果显示，在50mM、100mM和200mMH2O2作用浓度下，野生株与互补株的抑菌直径相比于缺失株的抑菌直径显著减少，其结果均有统计学意义（P<0.01）。Vero细胞毒性检测结果显示，野生株在50ul、1OOul滤液量时的细胞存活率明显低于缺失株（P<0.05），也明显低于互补株（P<0.05）。RT-PCR结果显示，相比于E.tarda野生株，缺失株鞭毛基因Flic的转录水平显著降低，而互补株鞭毛基因Flic的转录水平没有明显变化。通过用超速酸化离心法的提取的鞭毛蛋白的SOS-PAGE结果显示，缺失株的鞭毛蛋白的表达水平明显降低。　　 结论：通过以上试验，初步证明了E.tarda中eha基因的缺失对于该菌的生长没有影响，对E.tarda中的溶血功能具有调控作用，对E.tarda鞭毛基因的转录和鞭毛蛋白的表达有降低的作用，并且降低E.tarda的细胞毒性。通过以上研究，对探讨eha基因在E.tarda致病机制中的作用打下了基础。