【摘 要】
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脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一组常染色体隐性遗传性疾病.1995年法国学者Lefebvre发现位于5q13区的运动神经元生存(survival motor neuron,SMN)基因被认
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脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一组常染色体隐性遗传性疾病.1995年法国学者Lefebvre发现位于5q13区的运动神经元生存(survival motor neuron,SMN)基因被认为是该病的致病基因,该基因编码1个包含294个氨基酸(38 kDa)的蛋白质,即SMN蛋白.当SMN基因缺失或突变时,SMN蛋白数量减少,当低于运动神经元生存所需极限时,即导致运动神经元变性,临床发病.目前该病尚无有效的治疗方法,干细胞移植技术的出现,使人们看到了希望,但目前处在研究阶段.目的 该研究通过定向诱导人MSCs分化为神经元样细胞,研究神经元样细胞突触素蛋白的表达,初步探讨神经元样细胞的传导功能;检测SMN基因的mRNA及蛋白表达,为将来骨髓间质干细胞移植治疗SMA提供理论基础.目前关于SMN蛋白在神经元样细胞表达的研究,国内外尚未见报道.方法 ①分离和纯化人MSCs;②在体外用碱性成纤维细胞生长子预诱导人MSCs 24小时,再用二甲基亚砜和丁化羟基苯甲醚诱导人MSCs分化为神经元样细胞;③免疫细胞化学方法鉴定诱导的神经元样细胞是否表达神经元特异性标志物NSE、NF,以及突触素蛋白和SMN蛋白,并以未诱导的人MSCs做对照;④用RT-PCR检测诱导前人MSCs及诱导后神经元样细胞SMN基因mRNA的表达,并将诱导前后两组进行对比分析.结论:1.人MSCs能分化为神经元样细胞,并表达神经元的特异性标志物.2.神经元样细胞能表达突触素蛋白,但表达部位与成熟神经元不一致.3.人MSCs分化的神经元样细胞既能高表达SMN基因的mRNA,也表达SMN蛋白.
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