绣线菊内生真菌的分离及对植物病原菌的抑菌活性研究

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植物内生真菌是一种具有潜在研究价值的微生物资源,不仅能够促进宿主植物体内次生代谢产物的转化合成,而且内生真菌本身所产生的次级代谢产物结构新颖,用以替代日益枯竭的植物资源,具有极大的应用价值和开发潜力。本文从绣线菊中分离筛选得到2株内生真菌,编号为XXB7和XXT10,对几种重要的植物病原菌具有抑制作用,对其进行了生物学特性测定和代谢产物抑制植物病原菌活性研究。主要研究结果如下:1.采用组织分离法,从绣线菊的根、茎、叶组织内分离得到39株内生真菌。通过对峙试验,测定了39株内生真菌对苹果腐烂病菌(Cytospora mandshurica),苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici),番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum),小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum),葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)6种植物病原菌的拮抗作用。结果表明21株内生真菌对6种供试病原菌有不同程度的抑制作用。其中XXB7和XXT10菌株作用较明显,菌株XXB7对辣椒疫霉病原菌、苹果腐烂病原菌、小麦赤霉病原菌和葡萄灰霉病原菌的抑制率分别达到71.5%、70.8%、48.2%和41.3%;菌株XXT10对苹果炭疽病原菌、苹果腐烂病原菌、番茄枯萎病原菌和小麦赤霉病原菌的抑制率分别达到72.5%、73.2%、39.5%和42.7%。2.内生真菌XXB7和XXT10的ITS rDNA序列分析结果显示二者同均为链格孢菌(Alternaria)。生物学特性研究结果表明,两株菌生长的适宜温度为24℃~32℃,pH为6~10;蔗糖和乳糖分别是XXB7和XXT10的最适碳源;胰蛋白胨和蛋白胨分别是XXB7和XXT10的最适氮源;两株菌在PDA培养基上生长最好。3.采用抑制菌丝生长速率法,测定了菌株XXB7和XXT10发酵液和菌丝体甲醇粗提物在200mg/l和500mg/l浓度下对供试植物病原菌的抑制作用。菌株XXB7发酵液和菌丝体的甲醇粗提物,在浓度为200mg/l下,对辣椒疫霉病原菌的抑制率分别达到37.39%和22.18%;在浓度为500mg/l下,对辣椒疫霉病原菌的抑制率分别达到62.86%和36.47%。菌株XXT10发酵液和菌丝体的甲醇粗提物,在浓度为200mg/l下,对苹果炭疽病原菌的抑制率分别达到17.17%和67.07%;在浓度为500mg/l下,对苹果炭疽病原菌的抑制率分别达到69.10%和80.38%。
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