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目的：研究舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B（Akt）-内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的关系。方法：将成年雄性SD大鼠40只，体重250-280克，随机分为4组（n=10）：①假手术组（SHAM组）、②心肌缺血再灌注组(I/R组)、③舒芬太尼后处理组（SPO组）、④舒芬太尼后处理+PI3K特异性抑制剂LY294002组（SPO+LY组）。①组只穿线不结扎；②组结扎左冠状动脉前降支30min，再灌注120min；③组再灌注前5min经尾静脉静注1μg/kg的舒芬太尼；④组再灌注前5min先经尾静脉注射LY2940021.5mg/kg，用0.01%DMSO充分溶解。后给予舒芬太尼1μg/kg。再灌注120min时右侧颈总动脉采血，检测肌钙蛋白cTnI的含量。收集缺血区心肌组织，HE染色后观察组织形态学改变，使用免疫组化的方法检测缺血区心肌组织Akt、p-Akt、p-eNOS、eNOS的表达，并计算p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS间比值。结果：1）与①组相比，其余各组血清cTnI含量升高，差异有统计学意义（P<0.05）；与②组相比，③组血清cTnI含量明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）,④组血清cTnI含量差异无统计学意义（P>0.05）；与③组相比，④组cTnI含量差异有统计学意义(P<0.05)；2）各组都有免疫组化阳性表达，SHAM组表达最低。与①组相比，各组心肌p-Akt、p-eNOS的表达上调，p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS比值增加（P<0.05）；与②组相比，③组p-Akt、p-eNOS表达增多，p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS比值增加，差异有统计学意义（P<0.05），②组和④组间差异无统计学意义（P>0.05）；与③组比，④组上述指标表达降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：舒芬太尼后处理可以减轻大鼠心肌缺血再灌注的损伤，舒芬太尼可能通过激活PI3K-Akt-eNOS信号通路发挥心肌保护作用。