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蒙脱石(Montmorillonite,MMT)因其特殊的空间结构和理化性质,已被证实能改善断奶仔猪和肉仔鸡的肠道健康,但其对正常饲粮(霉菌毒素含量符合我国饲料卫生标准)条件下蛋鸡的肠道功能是否具有积极作用尚不明确。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)是当前家禽生产中应用广泛的饲用益生菌之一,能提高家禽肠道功能和生产性能,但其对蛋鸡的益生作用机制尚未完全阐明。体外试验表明,MMT和BS在抑制病原菌和维护肠黏膜屏障方面具有一定协同作用;另外,MMT和益生菌联用对改善仔猪肠道菌群、提高肠道功能和促进生长的作用优于二者单独使用。我们猜想MMT和BS在提高蛋鸡肠道功能和生产性能方面可能具有协同作用。因此,本试验旨在研究正常饲粮中添加MMT对蛋鸡生产性能和肠道功能的影响;同时探讨MMT和BS联用对蛋鸡生产性能的影响及其作用机制,以期为MMT和BS在蛋鸡生产中的应用提供理论依据。第2～4章MMT对蛋鸡生产性能、抗氧化能力和肠道屏障功能的影响选取480只75周龄健康的罗曼蛋鸡,随机分成5个处理组,每个处理组8个重复,每个重复12只鸡。对照组蛋鸡饲喂基础饲粮,试验组(MMT组)饲喂在基础饲粮分别添加0.3、0.6、0.9、1.2 g/kg MMT的试验饲粮。预试期7天,正试期70天。试验结果表明:1、随饲粮MMT添加水平的增加,试验1～5周蛋鸡产蛋率和日产蛋重有呈线性提高的趋势(0.05≤P<0.10),料蛋比有呈线性降低的趋势(P=0.058);蛋重(35天)、蛋壳厚度(70天)和蛋黄指数(35天、70天)呈线性提高(P<0.05),蛋壳强度(35天)有呈线性提高的趋势(P=0.076);血清ALP(35天)、ALT(70天)活性呈线性或二次曲线降低(P<0.05),T-SOD(35天)和GSH-Px(70天)活性呈线性和二次曲线提高(P<0.05),肝脏GSH-Px活性呈线性和二次曲线提高(P<0.05)。试验1～10周,添加0.9 g/kg MMT有改善蛋鸡产蛋性能的趋势。与对照组相比,0.9 g/kg MMT组试验1～5周蛋鸡日产蛋重显著提高(P<0.05),血清TC(70天)含量显著提高(P<0.05);0.3和0.9 g/kg组血清T-AOC(35天)显著提高(P<0.05)。2、饲粮添加MMT有提高盲肠菌群Shannon指数的趋势(P=0.096),有降低Simpson指数的趋势(P=0.095)。在属水平上,与对照组相比,MMT组瘤胃球菌属相对含量显著提高(P<0.05),0.6和1.2 g/kg MMT组多尔氏菌属和布劳特氏菌属相对含量显著提高(P<0.05),0.6 g/kg组帕拉普氏菌属相对含量显著增加(P<0.05)。随饲粮MMT添加浓度的增加,十二指肠大肠杆菌和沙门氏菌相对含量呈线性和二次曲线降低(P<0.05),与对照组相比,0.6、0.9和1.2 g/kg MMT组大肠杆菌相对含量显著降低(P<0.05),0.9和1.2 g/kg组沙门氏菌相对含量显著降低(P<0.05)。3、随MMT添加水平的提高,十二指肠绒毛宽度和回肠绒毛高度/隐窝深度呈线性和二次曲线变化(P<0.05),空肠Claudin-1和Claudin-5 mRNA表达量呈线性提高(P<0.05),NF-κB P65和TNF-αmRNA表达水平呈线性和二次曲线下调(P<0.05),血清内毒素含量呈线性和二次曲线降低(P<0.05)。与对照组相比,0.3、0.6和1.2 g/kg MMT组十二指肠sIgA浓度显著提高(P<0.05);0.6和0.9 g/kg组空肠sIgA水平显著提高(P<0.05),回肠内毒素含量显著提高(P<0.05),回肠MDA浓度显著降低(P<0.05)。综上,MMT可通过改善机体抗氧化性能,维护肝脏功能,优化肠道菌群和提高肠黏膜屏障功能在一定程度上改善了正常饲粮条件下蛋鸡生产性能和蛋品质如蛋黄指数、蛋壳厚度和蛋壳强度。第5～6章MMT和BS联用对蛋鸡生产性能、血浆指标、养分利用和肠道功能的影响本试验采用2×2双因子随机设计,选择360只29周龄健康的罗曼蛋鸡,随机分成4组,每组6个重复,每个重复15只鸡,分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+0.5 g/kg MMT(MMT组)、基础饲粮+5×10~8 CFU BS/kg(BS组)、基础饲粮+0.5 g/kg MMT+5×10~8 CFU BS/kg(MMT+BS组),预试期7天,正式期70天。试验结果表明:1、饲粮添加MMT显著提高了产蛋率、日产蛋重、蛋重(70天)、蛋壳厚度、蛋白高度、哈氏单位(35天)和血浆GSH-Px活性、IL-2水平以及空肠CAT1mRNA表达量(P<0.05),降低了料蛋比、血浆ALT活性和ACTH含量(P<0.05)。饲粮添加BS显著提高了产蛋率、日产蛋重、血浆T-SOD、GSH-Px活性和IgG、FSH含量以及干物质、粗脂肪、能量、粗蛋白的表观利用率(P<0.05)。MMT和BS对蛋黄指数(35天)、蛋黄重(70天)和血浆GLU、T-AOC、IL-4含量以及空肠GLUT2、CAT1 mRNA表达水平存在显著互作效应(P<0.05)。MMT+BS组产蛋率、日产蛋重、血浆IL-2含量显著高于对照组(P<0.05),料蛋比显著低于对照组和BS组(P<0.05),血浆T-SOD活性和能量表观利用率较对照组和MMT组显著提高(P<0.05),蛋黄颜色较MMT组和BS组显著提高(P<0.05),蛋重(70天)和血浆GSH-Px活性显著高于其它组(P<0.05)。2、饲粮添加MMT显著降低了肠道产气荚膜梭菌、沙门氏菌相对含量和空肠My D88 mRNA表达水平(P<0.05),提高了十二指肠sIgA含量和空肠Occludin、Mcuin-5ac mRNA表达量(P<0.05)。饲粮添加BS显著降低了肠道产气荚膜梭菌、沙门氏菌相对含量和血浆DAO活性、内毒素浓度以及肠道TLR-4、MyD88、NF-κB P65、TNF-α、IL-1βmRNA表达量和空肠NF-κB p65蛋白表达量(P<0.05),提高了空肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度和IκB-ɑ蛋白表达水平(P<0.05)。在属水平上,BS组巨单胞菌属和乳杆菌属相对含量较对照组显著提高(P<0.05);MMT+BS组梭菌属相对含量显著低于对照组(P<0.05),巨单胞菌属相对含量显著高于对照组和MMT组(P<0.05),丁酸弧菌属相对含量显著高于BS组(P<0.05)。MMT+BS组肠道产气荚膜梭菌、大肠杆菌、沙门氏菌相对含量和MyD88、IL-1βmRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),空肠Occludin mRNA表达量显著高于BS组(P<0.05),空肠TLR-4 mRNA表达水平和NF-κB P65蛋白表达量较对照组和MMT组显著下调(P<0.05),IκB-ɑ蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。综上,MMT可通过改善机体抗氧化和免疫性能,提高空肠Occludin、Mcuin-5ac表达和优化肠道菌群以及减少应激反应而提高蛋鸡的生产性能。BS能通过提升机体抗氧化和免疫能力,提高饲粮养分利用率,改善肠黏膜形态和微生态环境,调控肠道TLR信号通路和降低肠道通透性以及提高血浆FSH含量而提高蛋鸡产蛋性能。MMT和BS联用可通过增强机体抗氧化和免疫功能,提高饲粮能量利用率,改善肠黏膜形态和肠道菌群和调控肠道TLR信号通路而提高蛋鸡生产性能。总体上,二者对提高蛋鸡生产性能、抗氧化能力和肠道功能具有一定协同作用。