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目的:
(1)研究宫内感染免疫失败幼儿及其母亲乙型肝炎病毒(HBV)S基因序列情况,探讨宫内感染免疫失败与S基因序列的关系;
(2)研究T淋巴细胞亚群和血清IL-18因子在HBV宫内感染免疫失败幼儿体内的表达,探讨其作用,进一步了解其免疫功能状态。
方法:
(1)对35对宫内感染免疫失败幼儿及其母亲血清行实时荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)检测HBV DNA含量,行PCR技术及PCR产物直接序列测定,利用DNASTAR软件分析HBV S基因序列、基因型及编码氨基酸情况;
(2)流式细胞术及双抗夹心ELISA法分别检测35例免疫失败幼儿的T淋巴细胞亚群和血清IL-18水平,并与免疫成功幼儿比较。
结果:
(1)①本研究中宫内感染免疫失败幼儿及其母亲HBV DNA定量检测结果均在10<6>copies/ml以上;②免疫失败幼儿及其母亲HBV S基因核苷酸变异率分别为11.4%和17.1%;③母儿间序列同源性在99.3%以上;④35对母婴中23对HBV基因型为C型,血清型adr亚型,12对为B型,adw亚型,母婴基因型相同。
(2)①免疫失败组与成功组CD3<+>绝对计数差异无显著性,P>0.05; CD4<+>绝对计数免疫失败组明显降低,与成功组相比差异有统计学意义,P<0.05; CD8<+>绝对计数免疫失败组绝对计数高于成功组,差异有统计学意义,P<0.05; CD4<+>/CD8<+>比值免疫失败组明显较对照组低,差异有统计学意义,P<0.05;②免疫失败组血清IL-18水平明显低于免疫成功组,P<0.01,差异有统计学意义。
结论:
(1)①宫内感染免疫失败与母亲体内病毒的高复制有关;②HBV S基因变异不是高病毒血症患者宫内感染免疫失败的主要因素;③HBV C型与B型皆为宫内感染免疫失败的优势基因型,宫内传播过程中,基因型不变,母儿序列同源性极高。
(2)免疫失败组T淋巴细胞亚群比例失调,IL-18细胞因子表达异常,提示存在免疫功能异常。