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菠萝叶纤维作为新型纺织材料,对它脱胶的研究已经引起人们的关注。果胶裂解酶具有降解果胶的作用,木聚糖酶具有降解半纤维素的主要组成部分木聚糖的作用,因此,果胶裂解酶和木聚糖酶在脱胶的过程中起关键性的作用。本室已在大肠杆菌系统中成功表达了果胶裂解酶PelC,并且保留了表达载体pPIC9K-PelC和果胶裂解酶毕赤酵母工程菌P2。本文在此基础上,从绿色木霉(AS3.3711)中克隆了果胶裂解酶基因xyn2,并将xyn2克隆到酵母穿梭型表达载体pPIC9K,构建了重组表达载体pPIC9K-xyn2。将pPIC9K-xyn2线性化,转化毕赤酵母GS115,并且将pPIC9K-xyn2和pPIC9K-PelC同时转化毕赤酵母GS115,通过组氨酸营养缺陷型筛选,G418高拷贝菌株筛选,以及摇瓶诱导表达筛选,分别得到一株高表达木聚糖酶毕赤酵母菌株X5和一株同时高表达木聚糖酶和果胶裂解酶毕赤酵母菌株PX6。对P2、X5、PX6诱导表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表明：木聚糖酶毕赤酵母工程菌X5分泌表达木聚糖酶,分子量为21KD；果胶裂解酶毕赤酵母工程菌P2分泌表达果胶裂解酶,分子量为43 KD；果胶裂解酶和木聚糖酶双价工程菌PX6分泌表达果胶裂解酶和木聚糖酶,分子量分别为43KD和21KD。对P2、X5、PX6诱导表达产物进行酶的活力测定以及性质分析,发现果胶裂解酶毕赤酵母工程菌P2分泌表达果胶裂解酶,活力最高为14.2 U／ml；木聚糖酶毕赤酵母工程菌X5分泌表达木聚糖酶,活力最高为5.8U／ml；果胶裂解酶和木聚糖酶双价工程菌PX6分泌果胶裂解酶活力最高为12.6 U／ml,木聚糖酶活力最高为4.2 U／ml。果胶裂解酶的最适作用温度为50℃,最适pH值为5.4；木聚糖酶的最适作用温度为50℃,最适pH值为6.0。将双价工程菌PX6发酵生产出高活性的果胶裂解酶和木聚糖酶。用正交的方法确定了菠萝叶纤维脱胶的优化工艺参数为：时间4h,粗酶液用量为12%,pH值为5.5,温度为50℃。脱胶后的结果表明：纤维素的含量得到了提高,特别是对果胶质的降解达到了菠萝叶纤维纺织工艺的要求,但是半纤维素含量偏高。纤维细度得到了提高,同时纤维细度也变小,但是脱胶后断裂强度有所降低。