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目的:本研究目的是观察India Hedgehog(Ihh)信号在咬合升高诱发颞下颌关节骨关节炎(Temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA)中的表达情况,从而探讨Ihh信号在TMJOA发生进展中作用及机制。方法:随机地将48只年龄为八周的雄性Sprague Dawley(SD)大鼠等量地分为实验组和对照组。实验组采用“三明治夹心饼干法”建立SD大鼠双侧后牙的咬合升高模型以诱导大鼠产生TMJOA,而对照组除咬合升高外,其余操作步骤均与实验组相同。选择在咬合升高后的第3、7、14和28天,分别处死实验组及对照组的大鼠,每组各6只。通过苏木精-伊红和番红O固绿染色观察各组大鼠髁突软骨的组织学改变,并使用改进的Mankin,s评分系统来评估其髁突软骨的损伤程度。使用ELISA试剂盒检测各个组别大鼠血清内Ihh的表达变化,应用免疫组织化学染色检测髁突软骨组织内Ihh信号相关分子(包括印度刺猬蛋白(Ihh),平滑蛋白(Smo)和Gli锌指转录因子-1(Gli-1))、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白表达。采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)以进一步分析髁突软骨中Ihh信号相关分子、MMP-13和Caspase-3的基因表达。结果:组织学分析显示所有实验组大鼠的髁突软骨均出现骨关节炎样的结构改变,同时番红O固绿染色显示不同实验组大鼠的Mankin,s评分从5.98±0.74增加到8.58±0.63,说明随着咬合升高的时间延长,TMJOA的症状逐渐恶化。然而观察各个时间段的对照组大鼠髁突软骨,发现在组织形态学染色上没有明显的异常改变。免疫组化及RT-PCR的结果显示实验组中Ihh,Smo和Gli-1被激活,且其表达水平在咬合升高的早期阶段显著增加,而对照组Ihh信号的相关因子表达没有出现明显的波动。与对照组相比,实验组软骨细胞肥大标志物(MMP-13)和凋亡标志物(Caspase-3)的表达变化呈时间相关性,并对各个时间段的因子进行比较,差异是具有统计学意义的(P<0.05)。实验组与对照组大鼠只有在咬合升高后第七天,其血清内Ihh表达比较才具有统计学意义。结论:我们的数据表明,“三明治夹心饼干法”是建立SD大鼠TMJOA模型的成功方法。在TMJOA发生发展中,Ihh信号通路在髁突软骨损伤中发挥重要的调控作用,而且其激活与髁突软骨细胞的肥大密切有关。