糖苷生物碱(SGAs)是一类重要的次生代谢物质,在抵御病菌和害虫侵袭方面有重要的作用。通过分子方法改良可促进马铃薯地上部绿色组织中SGAs的积累,能提高其抗逆性和品质,可为选育马铃薯良种,促进育种技术的革新提供理论依据。本研究克隆了马铃薯茄啶鼠李糖基转移酶(SGT3)基因和1,5-二磷酸核酮糖羧化酶基因启动子(rbcS P),将克隆的sgt3 cDNA片段和rbcS启动子重组到pCEPSP载体上,构建了具有草甘膦抗性标记的绿色组织特异表达sgt3基因植物表达载体,利用农杆菌介导法对马铃薯品种‘陇薯3号’和‘夏波蒂’进行遗传转化。研究取得的主要结果如下:1.以pMDsgt3为模板亚克隆得到sgt3基因,以马铃薯DNA为模板克隆rbcS启动子,以pMDnos质粒为模板,亚克隆到nos终止子。2.生物信息学研究显示,sgt3开放阅读框长1518 bp,编码505个氨基酸,蛋白质分子量为56.985 kDa,等电点(pI)为5.02,α-螺旋结构占41.39%,延伸链占16.04%,β-折叠结构占8.91%,无规则卷曲占33.66%;亚细胞定位显示,该蛋白不具有叶绿体转运肽、线粒体导肽和分泌信号肽序列,推测其位于细胞质;3.采用酶切连接的方法,依次在基础载体pCEPSP中插入rbcS启动子、sgt3基因、nos终止子,最终构建具有草甘膦标记的绿色组织过表达sgt3基因重组载体。4.将表达载体导入马铃薯品种‘陇薯3号’和‘夏波蒂’,共获得了12株抗除草剂的阳性转化植株。5.使用RT-qPCR技术测定转化植株内sgt3的表达水平,分析表明,地上部sgt3相对表达水平较对照提高1.3-2.2倍,块茎中sgt3相对表达量比较稳定。6.采用比色法检测马铃薯不同组织SGAs的含量。转化苗的叶片中SGAs含量提高20%~37%,而块茎中SGAs含量变化比较稳定。