复方丹参对人羊膜上皮细胞AQP3表达的影响

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目的:研究复方丹参对人羊膜上皮细胞水通道蛋白3(aquaporin3,AQP3)表达的影响,探讨复方丹参治疗羊水量异常的机制。  方法:选取温州医学院附属第二医院产科的无并发症的羊水过少的孕妇8例以及羊水量正常的孕妇8例,分别于选择性剖宫产时术中取羊膜,进行原代培养羊膜上皮细胞,所有孕妇均系足月单胎,无其他妊娠合并症和并发症,无催产素引产史,无药物服用史,无过期妊娠、胎儿畸形、胎儿生长受限、胎儿窘迫及胎膜早破。采用RT-PCR和Western blot,检测复方丹参使用前后,两组人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)中AQP3 mRNA和蛋白的表达。  结果:  1.hAECs胞浆细胞角蛋白(cytokeratin-18,CK-18)表达阳性,胞核不表达,表达的阳性率在90%以上,证实原代培养的细胞为hAECs。  2.羊水过少组hAECs中AQP3表达较羊水正常组下调,差异有统计学意义(P<0.05)。  3.复方丹参浓度为0.01mg/ml时,两组hAECs中AQP3的表达达到峰值(P<0.05),超过此浓度,AQP3表达下调。  4.0.01mg/ml的复方丹参作用12h,两组hAECs中AQP3的表达达到高峰(P<0.05),随着作用时间延长,AQP3表达下调。  5.0.01mg/ml的复方丹参作用12h后,两组hAECs中AQP3的表达均上调,但羊水过少组hAECs中AQP3的表达上调较羊水正常组明显(P<0.05)。  结论:  1.hAECs是上皮细胞来源的,所以CK-18阳性表达于其胞浆。  2.羊水过少组hAECs中AQP3的表达较羊水正常组下调,这种改变可能是羊水量异常时发生的一种生理代偿反应。  3.0.01mg/ml的复方丹参作用12h后,使两组hAECs中的AQP3表达达到峰值,超过此浓度或者延长作用时间,AQP3的表达下调。  4.0.01mg/ml的复方丹参作用12h后,羊水过少组hAECs中AQP3表达上调较羊水正常组明显,提示羊水过少时复方丹参对hAECs中AQP3表达的调节作用更加显著。
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