苦竹内生真菌、南方红豆杉化学成分及生物活性的研究

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苦竹(Pleioblastus amarus (Keng) Keng f.)是禾本科大明竹属植物下的一个种,浙江省苦竹资源非常丰富。近年来的研究结果显示,植物内生真菌可产生多种生物活性物质,是一类具有潜在开发价值的微生物新资源。南方红豆杉属于红豆杉科、红豆杉属的一个种。近年来,国内不少地方在大面积引种南方红豆杉,并且3-7年生的南方红豆杉的枝叶能够取代野生的南方红豆杉树皮作为提取抗癌成分紫杉醇和10-DABⅢ的原料。本文首先以新鲜苦竹Pleioblastus amarus (Keng) Kengf.)作为原料,首次从中分离得到一株内生真菌Xylaria sp.(L1)菌,通过微生物发酵的方法得到大量的Xylaria sp.(L1)菌次级代谢产物,然后重点研究了这些次级代谢产物的化学成分和生物活性。然后以人工引种的南方红豆杉为原料,对其进行了化学成分的测定分析和化感作用的研究,以期为更加合理有效地利用这一资源提供参考。研究结果如下:1.化学成分研究通过各种色谱技术,从苦竹内生真菌的次级代谢产物中分离鉴定出了9个单体化合物,分别是:(1)麦角甾醇,(2)L-苯基乳酸,(3)(4E,8E)-N-D-2’-hydroxyoctade canoyl-1-O-p-D-glycopyranosyl-9-methyl-4,8-sphingadienine,(4)紫铆因,(5) Cerebr oside A,(6)没食子酸甲酯,(7)没食子酸,(8)香草醛,(9)豆甾醇。以上化合物均为首次从苦竹内生真菌的次级代谢产物中得到。建立RP-HPLC方法对不同生长年限、不同采收期的南方红豆杉中紫杉醇和10-DAB Ⅲ进行了含量测定,探讨南方红豆杉中紫杉醇和10-DAB Ⅲ含量的变化规律,为南方红豆杉的质量控制提供一定的参考依据。2.生物活性研究采用DPPH法测定并评价了苦竹内生真菌5个不同洗脱部位的抗氧化活性,采用斜面试管法测定并评价了5个洗脱部位的抗真菌活性,采用海虾致死的生物活性试验测定并评价了5个部位的细胞毒活性。结果显示苦竹内生真菌次级代谢产物的5个不同洗脱部位均具有一定的自由基清除能力和抗真菌活性,但细胞毒活性较弱。3.化感作用研究采用生物测定的方法研究苦竹内生真菌次生代谢产物的不同部位对油菜、萝卜、莴苣3种农作物种子萌发和幼苗生长的影响。结果显示不同部位的Xylaria sp.(L1)菌次生代谢产物对萝卜、莴苣的种子萌发率和萌发指数表现出“低浓度促进,高浓度抑制”的双重浓度效应,对油菜种子的萌发率和萌发指数无影响;高浓度Xylaria sp.(L1)菌次生代谢产物提取液对油菜、萝卜、莴苣的根长、苗高和鲜重表现出化感抑制作用。采用生物测定了方法研究了南方红豆杉水浸液对油菜、萝卜、大豆、莴苣4种双子叶农作物的种子萌发和幼苗生长的化感效应。结果表明油菜、萝卜、大豆及莴苣均不适合跟南方红豆杉进行套种,并且推测双子叶农作物基本上不适合与南方红豆杉套种。
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