多抗俘获ELISA检测REV方法的初步建立

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:CIA007
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该研究以IFA试验和PCR方法作为检测REV病毒在CEF细胞(鸡胚成纤维细胞)上繁殖效果的检测手段,以REV5个毒株(C<,48>、DIA、M、S、T)的粗提纯物作为制备抗REV病毒高效价多抗血清的抗原,成功地制备了可用于包被的抗REV病毒的多抗血清,在此基础上以抗REV的群特异性的单克隆抗体为检测二抗,初步建立起了多抗俘获ELISA检测REV病毒的方法.该检测系统的最佳反应条件为:包被用多抗1:20;粗提纯病毒1:100;抗REV群特异性单克隆抗体1:20;羊抗鼠酶标二抗1:2000.在同一条件下,将马立克氏病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病毒、新城疫病毒、减蛋综合征病毒及传染性支气管炎病毒进行多抗俘获ELISA检测,结果表明,该检测系统的特异性良好.用临床采集的200份血清样品,与进口ELISA试剂盒进行敏感性比较试验,结果表明二者的符合率为91.5﹪.该方法建立为下一步试剂盒的研制工作打下了基础.
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