【摘 要】
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采用抗REV单抗(McAb)11B154及FITC标记的山羊抗小鼠二抗检测鸡胚成纤维细胞(CEF)培养的禽网状内皮组织增生症病毒(REV)REV-T株和山东株.接毒后2天,即可观察到特异性荧光.IFA
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采用抗REV单抗(McAb)11B154及FITC标记的山羊抗小鼠二抗检测鸡胚成纤维细胞(CEF)培养的禽网状内皮组织增生症病毒(REV)REV-T株和山东株.接毒后2天,即可观察到特异性荧光.IFA对REV病毒增殖的最短鉴定时间为7天,最小感染剂量为10<-6>.用PCR方法检测三种REV毒株(REV-T、山东株、扬州株)培养CEF 7天的细胞DNA,所合成的两对引物均能扩增出完全复制毒株山东株、扬州株的长末端重复序列(LTR),而复制缺陷型病毒REV-T的LTR不能被扩增.将REV山东株的扩增片段测序共有282个碱基,与标准毒株REV-A的LTR比较,同源性为97％.敏感性试验对REV山东株细胞DNA的最小扩增量为200pg.采用建立的IFA试验和PCR方法对不同厂家的126批禽用活毒疫苗进行了检测.IFA检出了一份阳性样品.PCR均呈阴性,并用Dot-blot验证PCR结果.IFA阳性样品为非免疫胚生产的ND疫苗,污染疫苗的REV病毒株为REV-T株.
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