姜黄素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制的探讨

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目的:研究姜黄素对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨其抗癌作用的分子机制.方法:应用台盼蓝拒染法,MTT比色法观察姜黄素对细胞生长的抑制作用.应用倒置相差显微镜,HE染色法观察药物作用后细胞形态结构改变.DNA凝胶电泳和TUNEL法分析细胞凋亡情况.免疫组化SABC法检测Bcl-2、P53蛋白在姜黄素诱导Hela细胞凋亡中的作用.结果:姜黄素可明显抑制宫颈癌Hela细胞的体外生长.MTT法显示5μmol/L-80μmol/L浓度的姜黄素作用48h后,细胞的抑制率分别为12.4%,33.6%,40.7%,67.3%和75.2%,呈剂量依赖性.不同浓度姜黄素作用后,倒置显微镜及HE染色法证实肿瘤细胞形态呈凋亡特征性改变,如细胞核明显皱缩、凋亡小体形成.TUNEL法可检测到细胞内呈棕黄色颗粒的凋亡细胞.10,20,40μnol/L姜黄素作用24h后,细胞凋亡率分别为(13.88±3.18)%,(21.63±2.45)%,(36.25±3.28)%:作用48小时后凋亡率分别为(23.38±1.92)%,(31.75±3.1)%(43.63±3.02)%;10-40μmol几姜黄素作用Hela细胞24h-48h时,随着浓度增大,细胞凋亡率增大,相同浓度下48小时细胞凋亡率高于24小时细胞的凋亡率,即呈时间剂量依赖性.同时发现,10μmol/作用12h后就可引起凋亡.10,20,40μmol/L姜黄素作用48小时后免疫组化SABC检测Bcl-2蛋白表达率为(71.13±3.36)%,(63.503.51)%,(408.63±2.97)%,与对照组(83.50±5.29)%相比有显著性差异(p<0.0.5).结论:姜黄素对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela细胞凋亡发生;凋亡在24-48h内呈时间剂量性.其抗癌机制可能通过下调Bcl-2蛋白表达引起细胞凋亡有关.
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