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目的:本研究通过检测胃癌组织中CUL4B的表达情况来探讨胃癌组织中CUL4B的表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系;本研究采用si RNA干扰技术干扰CUL4B的表达后,观察并分析胃癌细胞中CUL4B的表达变化对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:1.采用免疫组织化学染色方法检测82例胃癌标本的CUL4B表达情况,标本均为经病理确诊后经手术切除的胃癌组织。免疫组织化学染色方法结果采用SPSS 16.0软件进行统计,并分析CUL4B的表达水平与胃癌侵袭性表型的相关性;2.采用Western blot检测胃癌组织及正常组织中CUL4B的表达情况;3.采用Western blot检测6株胃癌细胞系和1株正常胃粘膜细胞中CUL4B的表达水平;4.采用si RNA干扰MGC803细胞系中CUL4B的表达,实验分组分别为:阴性对照组(转染FAM-NC)及干扰组(si RNA-958,si RNA-2247)。转染完成后,采用Western blot检测转染前后CUL4B蛋白表达水平的变化及采用q RT-PCR法检测转染前后CUL4B m RNA表达水平的变化。5.采用Transwell法检测MGC803细胞在si RNA干扰前后侵袭、迁移能力的变化。6.采用平板克隆法检测胃癌MGC803细胞在si RNA干扰前后增殖能力的变化。7.采用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白上β-catenin及Cyclin-D1表达水平的变化;结果:1.CUL4B在胃癌组织中表达上调:采用免疫组织化学染色方法检测胃癌切除标本中胃癌组织CUL4B的表达情况,结果显示CUL4B在78.04%(64/82)病例的肿瘤组织中表达上调。与临床资料进行统计学分析,结果显示CUL4B的高表达与胃癌侵袭性表型(高TNM分期、淋巴结转移、血管侵犯)相关(p<0.05);2.CUL4B在胃癌细胞系中表达上调:采用Western bloting检测的6株胃癌细胞系(分别为AGS、BGC823、MGC803、HGC27、SGC7901、MKN45)和1株正常胃粘膜细胞GES-1中CUL4B的表达情况,发现CUL4B的表达水平较正常细胞而言,在胃癌细胞中的表达升高,并且,差异具有统计学意义(p<0.05);3.Western blot结果显示CUL4B在胃癌组织中的表达水平较正常组织的表达水平明显上调,且差异具有统计学差异(p<0.05);4.Western blot及q RT-PCR检测转染前后CUL4B蛋白和CUL4B m RNA的表达水平较阴性对照组明显下调(p<0.05);5.Transwell法侵袭迁移实验结果显示:实验组细胞侵袭及迁移能力较阴性对照组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);6.细胞平板克隆实验结果显示,实验组细胞克隆形成能力较阴性对照组明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);7.si RNA转染胃癌MGC803细胞后,Wnt/β-catenin信号通路上β-catenin及Cyclin-D1蛋白表达水平均显著下降(p<0.05)。结论:1.CUL4B主要表达于细胞核,且其在胃癌组织中表达上调。CUL4B的高表达与胃癌侵袭性表型相关。2.CUL4B在胃癌组织中的表达水平较正常胃组织升高,且差异具有统计学意义。3.CUL4B在胃癌细胞系中的表达水平普遍升高。4.si RNA干扰胃癌细胞CUL4B的表达后,明显影响胃癌细胞的侵袭、迁移和细胞克隆形成能力。5.Wnt/β-catenin信号通路蛋白可能参与影响胃癌细胞的生物学行为。6.胃癌组织中CUL4B基因的表达水平与胃癌的发生、发展可能存在一定联系,有望为胃癌的诊断和治疗提供新思路。