西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子萌发及幼苗抗寒性的研究

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西伯利亚乌头[Aconitum barbatum Pers.var.hispidum(DC.)Seringe]和伏毛铁棒锤(Aconitum flavum Hand.-Mazz.)隶属于毛茛科乌头属,均为多年生草本植物,二者的根和子根可入药,是典型的民族药材,且是乌头碱提取的主要原材。如今,在生物医药开发领域对乌头碱的需求量日益增大,而野生西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子繁殖率很低,加之野生资源被过度采挖,导致蕴藏量逐年削减,远不能满足市场需求。那么人工引种驯化、栽培繁殖是解决资源缺少的唯一途径。然而,在实际生产过程中主要面临着两个困境:其一,西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子存在明显休眠现象,这给播种带来很大困扰;其二,低温影响着药材的产量和品质。因此,本文旨在探究这两种植物种子的休眠因素及如何破除休眠;再者,提高二者幼苗的抗寒性为药材的种植提供御寒技术理论。以西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子为实验材料,经TTC染色法测定种子生活力,测定种子吸水率,用小麦和白菜种子及自身种子测试粗提液抑制活性,并用流水冲洗种子的方法探究种子休眠的因素;采用不同类别不同浓度的化学药剂摸索打破种子休眠的最佳方法;通过不同温度梯度找出种子萌发的最适宜温度;使用光照培养箱模拟低温环境,探究喷施外源添加物SNP溶液对幼苗抗寒性的影响。研究结果主要如下:1.西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子吸水性良好,种皮不存在机械阻力,不会对种子有吸水障碍,因此不是造成休眠的因素。2.西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子生活力均很高,种胚发育成熟,不是导致种子发芽率低的因素。3.种子粗提液对其它植物种子及对自身种子的萌发和幼苗的生长均具有明显的抑制作用,且粗提液浓度越大抑制活性越强,说明粗提液中含有某种抑制性物质能够抑制其它植物种子及自身种子的萌发,所以内源抑制性物质的存在在种子休眠的因素中起主导作用。4.流水冲洗相比静水浸种显著提高了种子的发芽率,表明流水冲洗可减少(或稀释)种子的内源抑制性物质,进一步说明种子休眠的因素是存在内源抑制性物质。5.探究不同温度对西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子萌发的影响,结果显示,20℃时是西伯利亚乌头种子萌发的最佳温度;16℃时是伏毛铁棒锤种子萌发的最佳温度。6.GA3、KMnO4、KH2PO4、H2O2均可打破种子的休眠,提高西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤种子的发芽率、发芽势及活力指数,并缩短了发芽时滞。尤其500 mg/L GA3对西伯利亚乌头种子处理效果最好,发芽率由自然状态下的44%提高到76%;250 mg/L GA3对伏毛铁棒锤种子处理效果最好,发芽率由自然状态下的16.56%提高到85.00%。7.最佳浓度200μmol/L的SNP溶液处理西伯利亚乌头幼苗和150μmol/L的SNP溶液处理伏毛铁棒锤幼苗与对照相比抗氧化酶SOD、POD、CAT活性,可溶性糖,游离脯氨酸,叶绿素(a+b)含量显著提升;丙二醛,过氧化氢等有害物质的积累显著减少。表明西伯利亚乌头和伏毛铁棒锤幼苗对冷环境表现出了抗逆性。
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