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背景牙周炎、外伤、根管治疗失败等原因造成的牙列缺损是临床常见的口腔疾病,种植义齿修复多被认为是当前最优选的修复方式。但是,骨缺损成为种植手术面临的首要障碍。目前,引导骨再生(Guided bone regeneration,GBR)技术是临床常用的修复骨缺损的骨增量手术,而GBR术中使用的屏障膜是不可缺少的,可以保障新骨的顺利生成。目前,可吸收胶原膜成为普遍使用的屏障膜,其仅具有引导骨再生的作用,骨再生的效果并不稳定。因此,开发新的、能够提高GBR术骨再生效果的新型屏障膜的研究备受关注。目的本实验探讨人工合成材料1,8辛二醇-共-柠檬酸盐(1,8 octanediol-co-citrate POC)与人脱细胞羊膜(Human acellular amniotic membrane,HA AM)的复合膜(POC-HAAM膜)与Bio-Gide胶原膜相比较,修复大鼠胫骨缺损的效果。方法1.POC的制备(1)POC的制备:通过化学反应合成,聚合物POC呈软且粘稠的透明胶冻状,有一定弹性和粘性,溶于无水乙醇。(2)四层交联HAAM的制备:四层HAAM用载玻片在冻干机中加压交联至少12h,成品呈半透明状,吸水后易展开,韧性及强度较单层羊膜明显增强。(3)POC-HAAM的制备:四层交联HAAM膜浸入POC无水乙醇中24小时,烘干后为白色不透明膜,可明显的见到白色聚合物POC均匀附着于膜表面,复合膜的弹性和韧性较四层交联HAAM增强。Co60辐照灭菌后备用。2.实验动物:选择Sprague-Dawley(SD)大鼠,共25只,8周龄,每只体重约为340±20g。3.实验分组:将25只SD大鼠随机分为5组,正常组、缺损组、Bio-oss组、POC-HAAM组、胶原膜组,每组5只。(1)正常组不做任何处理;(2)缺损组胫骨处建造3.5mm×4mm缺损,不做修复;(3)Bio-oss组胫骨处建造3.5mm×4mm缺损,充填Bio-oss骨粉;(4)POC-HAAM组建造3.5mm×4mm缺损后,充填Biooss骨粉,覆盖POC-HAAM膜;(5)胶原膜组建造3.5mm×4mm缺损后,充填Biooss骨粉,覆盖胶原膜。8周后,处死全部大鼠后取材,做相应分析。4.检查方法:(1)大体观察:通过大体观察初步判断缺损组、POC-HAAM组与胶原膜组胫骨缺损处是否有新生骨生成;(2)影像学观察:通过X线与CBCT观察新生骨生成部位、分布情况与新生骨量;(3)组织学观察:进行HE染色和Masson染色,观察骨缺损部位外形恢复情况及新骨生成情况。5.结果(1)大体观察:通过大体观察缺损组有明显骨缺损;Bio-oss组表面可见明显骨粉,缺损处平面基本与正常骨组织面相平;POC-HAAM组和胶原膜组表面骨粉颗粒少于Bio-oss组,且缺损处有残留膜材料。(2)影像学观察:x线可见缺损组低密度影最大,Bio-oss组、POC-HAAM组和胶原膜组可见白色骨粉阻射影;CBCT观察各组三维重建影像中,缺损组缺损区域最大,骨缺损中心呈现未愈合状态,有少量新骨生成。Bio-oss组缺损区域小于缺损组,表面可见骨粉颗粒突起,髓腔内充满骨粉。POC-HAAM组外形恢复最好,表面骨粉颗粒少于其余两组,胶原膜组缺损区域小于缺损组,可见明显骨粉颗粒残留;横截面和纵截面显示缺损组内侧皮质骨不连续,可见明显骨缺损,Bio-oss组、POC-HAAM组和胶原膜组髓腔内被骨粉充填,根据横截面可见Bio-oss组和POC-HAAM组外形类似正常骨组织,胶原膜组外形恢复稍差。(3)组织学染色观察:样本进行石蜡切片后,分别进行HE染色和Masson染色,缺损组骨缺损凹陷明显,仅形成少量新骨,骨小梁紊乱,Bio-oss组残留较多骨粉维持一定骨骼形态,可见有编织骨交织,但是新生骨量少,血运较差;POC-HAAM组外形恢复类似正常骨组织,残留少量骨粉,POC-HAAM膜下方新生骨组织较成熟,血运恢复好于Bio-oss组,胶原膜组可见外形有凹陷,髓腔内有残留骨粉,缺损区表面有胶原膜残留。测量并计算各组HE染色的新生骨面积百分比,Bio-oss组、POC-HAAM组和胶原膜组新生骨面积均大于缺损组,差异具有统计学意义(P<0.05);POC-HAAM组新生骨面积大于胶原膜组,差异具有统计学意义(P<0.05);胶原膜组新生骨面积多于Bio-oss组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)对于CSD(极限骨缺损),若不施加任何干预措施,缺损部位不会愈合;(2)对于仅使用Bio-oss骨粉组,骨缺损部位可以维持一定的骨骼形态,但是缺损部位骨愈合时间延长,新骨量少;(3)POC-HAAM膜和胶原膜均具有良好的GBR屏障膜的作用,POA-HAAM膜的修复作用好于胶原膜。