电化学法测定超氧化歧化酶活性的研究

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在生命活动的代谢过程中不断产生各种氧自由基,超氧阴离子自由基(O2-)和羟基自由基(HO-)是具有代表性的重要的活性氧自由基,它们与生物体的衰老、心脑血管病、风湿性关节炎、癌症等许多病理都有重要的关系。生物体中一些具有抗氧化活性的酶可以控制生物体中自由基的量,如超氧化歧化酶(SOD)和过氧化物酶(PO)。众所周知一些非酶活性的物质也具有抗氧化活性,如维生素、中草药和黄酮类化合物等。近年来,从生物体中清除过量的自由基,以及寻找一些能清除自由基的抗氧化剂倍受重视,因此,SOD活性测定和抗氧化剂清除自由基的能力的研究显得尤为重要。本文建立了快速简便测定SOD活性的四种方法,论文包括以下四部分: 1、介绍了活性氧自由基与疾病、超氧化歧化酶和超氧阴离子自由基之间的关系。综述了近年来国内外超氧化歧化酶活性测定及中草药清除活性氧自由基的发展和应用。 2、在Na2CO3-NaHCO3(pH8.9)缓冲溶液中,SDS对钯(Ⅱ)与8-羟基喹啉-5-磺酸(8-OXSA)络合物峰电流有明显的增敏作用,其反应机理与电极表面生成的O2-有关。由于超氧化歧化酶(SOD)可催化O2-发生歧化反应,使钯-8-OXSA-SDS体系的峰电流降低,本文依此建立了测定SOD活性的方法,并研究了几种常见的黄酮类化合物清除O2-的作用。 3、盐酸羟胺在碱性水溶液中发生自氧化反应,可产生O2-,自身被氧化为亚硝酸根离子,在酸性介质中SCN-催化亚硝酸根离子与二苯胺或二苯胺-4-磺酸反应生成具有电活性的亚硝基化合物,在-0.67V和-0.60V处有一波形很好的二阶极谱峰。在一定条件下,极谱峰电流的大小与亚硝酸根离子的浓度呈线性关系。SOD可使O2-发生歧化反应,体系中加入SOD,使生成的亚硝酸根离子的量减小,由此建立了通过检测亚硝酸根离子的生成量来测定超氧化歧化酶活性的电化学方法。测定了酶活力曲线,并研究了常见的黄酮类化合物对O2-的清除作用。 4、邻苯三酚在碱性条件下,可以发生自氧化反应,产生O2-,其自氧化产物在-0.96V和-1.44V(SCE)有两个还原波,用极谱法研究了邻苯三酚在
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