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研究背景:1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)是一种T细胞介导的,以胰腺β细胞破坏为特征的器官特异性自身免疫性疾病。T淋巴细胞持续活化是导致胰岛β细胞破坏的一个重要环节。PD-1(programmed death-1)及其配体 PD-L1(programmed death ligand-1)介导负性协同刺激信号,可以有效抑制T、B细胞功能及增殖,同时减少细胞因子分泌。同时PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂相关性自身免疫性糖尿病的报道逐渐增多,提示PD-1/PD-L1信号通路的阻断可能与T1D的发生存在某种联系。本研究拟探讨PD-1/PD-L1在T1D发病中机制的作用。方法:纳入88位T1D患者及88位健康对照,通过酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清可溶性 PD-L1(soluble PD-L1,sPD-L1)的浓度。采用流式细胞术,对33位T1D患者,18位健康对照进行T淋巴细胞亚群及其PD-1表达水平检测;对24位T1D患者,13位健康对照进行B淋巴细胞亚群及其PD-L1表达水平检测,并分析临床指标的相关性。从国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)数据库中选择 PD-1 和 PD-L1基因中的 8 个 SNP(Sincesinglenucleotidepolymorphisms),纳入 166 位 T1D 患者,及100位与T1D患者年龄、性别匹配的健康人,通过焦磷酸测序PSQ 24系统进行PD-1和PD-L1基因中每种多态性的基因分型,并分析与T1D易感性及临床指标的相关性。结果:1.sPD-L1在T1D患者和健康对照组中均可检测到。与健康对照相比,T1D患者中sPD-L1的浓度明显降低(P<0.002)。2.T1D组与健康对照组外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞比率无显著性差异。T1D组CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞表达PD-1分子明显低于健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。3.T1D组与健康对照组外周血B细胞(CD19+)及6个主要的B细胞亚群:单纯性 B 细胞、记忆性 B 细胞、B10、MZB(MarginalzoneB)、FOB(FollicularB)、T2-MZP(Transitional2-marginalzoneprecursor)比率均无显著性差异。T1D 组 CD19+B细胞、记忆性B细胞、T2-MZP上PD-L1表达明显低于健康对照组。而单纯性B细胞、B10、MZB、FOB细胞上PD-L1表达在T1D组与健康对照组之间无显著性差异。Pearson相关分析显示MZB细胞PD-L1与BUN呈正相关性,FOB细胞上PD-L1与低密度脂蛋白呈负相关。4.PD-L1 SNP rs4143815与T1D易感性之间均存在显着相关性(P<0.05)。与C等位基因携带者相比,在rs4143815G/G基因型纯合的T1D患者中,自身抗体(autoantibodie,AAB)阳性率更高(P=0.033)。结论:T1D患者血清可溶性PD-L1的表达以及外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞上膜型PD-1,B淋巴细胞及部分B细胞亚群上膜型PD-L1的表达低于健康对照组。PD-L1 SNP rs4143815与T1D易感性之间均存在显着相关性。提示PD-1/PD-L1信号通路可能参与了 T1D的发病机制,并在T1D的发病中起保护性作用。