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目的:1、进一步证实丹参酮Ⅱ-A体外诱导人肿瘤细胞(白血病和肝癌)凋亡的作用;2、应用流式细胞技术分析丹参酮Ⅱ-A对NB4和SMMC-7721细胞周期和凋亡相关基因蛋白表达的影响;3、应用基因芯片技术分析丹参酮Ⅱ-A对NB4细胞凋亡等相关基因RNA表达的影响,探讨丹参酮Ⅱ-A作用的分子机理.方法:1、细胞培养和药物处理:体外培养人急性早幼粒白血病细胞(NB4)和人肝癌(SMMC-7721)细胞系,分别用不同浓度(0.125,0.25,0.5,1.0 mg.L<-1>)丹参酮Ⅱ-A处理细胞24、48、72、96或120小时后进行细胞计数和MTT检测,0.5 mg.L<-1>丹参酮Ⅱ-A处理NB4和SMMC-7721细胞72或96小时后进行以下指标检测.2、光镜、电镜观察细胞形态改变;3、细胞计数、MTT试验、集落形成试验检测细胞生长和增殖情况;4、琼脂糖凝胶电泳分析细胞DNA"梯状"断裂;5、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡相关基因蛋白表达改变;6、基因芯片技术分析NB4细胞基因表达的改变:无毒剂量的丹参酮Ⅱ-A(0.5 mg.L<-1>)处理细胞72小时,收集细胞并提取总RNA,反转录获得cDNA,再转录并标记成cRNA(Cy3荧光标记),然后与Express Chip H04芯片(包括3360基因点)杂交,最后对芯片进行扫描和数据分析(对信号值有2倍以上变化的基因及相应的ID进行对比分析).结论:1、小剂量丹参酮Ⅱ-A在体外能明显诱导人急性早幼粒白血病细胞和人肝癌细胞凋亡;2、参酮Ⅱ-A诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制可能是上调凋亡相关基因p53、fas和bax,下调bcl-2和c-myc蛋白表达,并调控与细胞凋亡、增殖和分化等密切相关的多种基因(183条)RNA表达,特别是调控电压依赖的阴离子通道和细胞色素C等,通过线粒体膜电位的改变使线粒体释放细胞色素C,提示可能与线粒体通路有关;3、丹参酮Ⅱ-A可能是一种有潜力的、高效无毒的抗肿瘤侯选新药,值得进一步研发.