兔颈总动脉狭窄后脑缺血再灌损伤对VEGF及AKt表达的影响及意义

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目的:本实验通过建立颈动脉狭窄模型,研究颈动脉狭窄后兔脑局灶性缺血再灌注损伤对血管内皮生长因子(VEGF)及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKt)表达的影响及意义。方法:应用70只新西兰兔随机分组:正常对照组(A组,n=5),假狭窄组(B组,n=5),狭窄组(C组,n=5);狭窄+假缺血组(D组,n=5),缺血再灌注组(E组,n=25),狭窄+缺血再灌注组(F组,n=25),E、F组根据再灌注时间等分为5个小组,即再灌3小时、6小时、24小时、48小时及27小时组。C、D、F组行“针控线栓法”建立双侧颈总动脉中度狭窄,B组行假狭窄以及C、D、F组狭窄术后的实验动物恢复正常喂养15天,E、F组再予以右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)制作局灶性脑缺血再灌注模型。狭窄后动物进行血管超声检查证实血管狭窄程度。分别采用2%氯化三苯四唑(TTC)染色法观察梗死面积;行病理学检查;TUNEL原位杂交法观察脑缺血侧海马区细胞凋亡的情况,并计算阳性细胞数;应用免疫组织化学法检测脑缺血侧海马区VEGF及AKt表达情况,分别计算IA值,进行组间比较及相关性分析。结果:1.TUNEL检测:A、B、C、D组偶见凋亡细胞,E、F组凋亡细胞数量较A、B、C、D组增加(P<0.01),再灌注3小时后凋亡细胞数量升高,于6小时后达高峰,对应时间点F组凋亡细胞数量较E组少(P<0.01)。2:免疫组化结果:A、B组VEGF极少量表达,C、D组VEGF表达高于A、B组(P<0.01),C、D组高于A、B组AKt表达(P<0.01);E、F组各时间点VEGF、AKt表达IA值有统计学差异(P<0.01),E、F组间IA值比较有统计学意义(P<0.01)。结论:1.双侧颈动脉中度狭窄可一定程度上减轻兔脑局灶性缺血再灌注损伤的程度。2.AKt参与缺血神经细胞内信号转导,并可能通过上调VEGF的表达,而起到增强缺血耐受的作用。
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