Isoline和clivorine分别是橐吾属药用植物大黄橐吾和鹿蹄橐吾中大量含有的吡咯里西啶生物碱。本论文主要对isoline和clivorine的毒性及其机制进行了研究，并初步探讨了龙胆苦苷对isoline肝毒性的影响及其常见抗氧化剂对clivorine肝毒性的影响。论文总体分为两部分，第一部分为isoline的毒性研究，第二部分为clivorine的毒性研究。　　 对isoline毒性的研究中我们发现isoline明显抑制了原代培养大鼠、小鼠肝细胞的生长，进一步采用DNA ladder的方法可以检测到isoline诱导的肝细胞凋亡DNA片段，用蛋白电泳实验检测到了凋亡相关caspase-3酶的活化，说明isoline可以诱导肝细胞的凋亡。氧化应激在肝损伤中起重要作用，我们的实验发现isoline增加了肝细胞和组织的脂质过氧化损伤。进一步实验发现isoline对肝细胞内谷胱廿肽过氧化酶(GPx)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化歧化酶(SOD)的活性均有明显影响，说明肝内氧应激系统对isoline的肝毒性有一定的调控作用。在小鼠体内实验中我们进一步检测了isoline对氧化应激系统的影响，发现isoline可以对小鼠的主要器官如肝、脑、心、肺、肾均造成不同程度的氧化应激损伤，而其中肝脏是受损伤最严重的器官。对isoline肝毒性机制的深入研究发现isoline可以激活肝组织和原代培养肝细胞内c-Jun氮末端激酶(c-Jun N terminal kinase，JNK)，同时MTT实验发现JNK抑制剂SP600125可以抑制isoline的肝细胞毒性，说明JNK激酶信号通路在isoline肝毒性中发挥重要的调控作用。进一步的实验发现从保肝利胆中药龙胆中分离的化合物龙胆苦苷可以明显降低isoline激活的JNK，说明龙胆苦苷可能是通过调控了JNK从而发挥拮抗isoline肝毒性的作用。　　 在对clivorine肝毒性的研究中我们发现clivorine明显抑制了人正常肝细胞的生长，进一步采用DNA ladder的方法可以检测到clrvorine诱导的肝细胞凋亡DNA片段，用蛋白电泳实验检测到了caspase-3酶的活化，说明clivorine的肝毒性主要是通过诱导肝细胞凋亡。进一步的实验发现clivorine明显降低了肝细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的含量，同时细胞内GSH合成前体(NAC)可以明显改善clivorine降低的肝细胞存活率和诱导的肝细胞凋亡，NAC还抑制了clivorine诱导的caspase-3酶剪切活化。接下去我们又在原代培养的大鼠肝细胞上进一步观察了clivorine对肝细胞内氧应激系统的影响，发现clivorine增加了脂质过氧化损伤；对肝细胞内GPx、GST、GR、CAT、SOD等氧应激相关酶活性均有一定的影响。我们的实验充分说明肝内氧应激系统参与调控了clivorine的肝毒性。接下去在凝胶阻滞实验及彗星实验中我们发现clivorine对DNA具有潜在的直接损伤作用。在肝细胞水平上，我们采用MTT实验检测了常用抗氧化成分和保肝利胆中药成分对clivorine肝毒性的影响，结果发现Trolox、黄芩苷对clivorine的毒性具有明显的拮抗作用。