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针对目前植物提取物对复方的研究较少且作用机制不明等问题,本课题在此基础上,通过体外抑菌、抗氧化和抗炎试验,在小鼠上的安全应用剂量、促生长效果研究及肠黏膜损伤试验,研制出多功能且性价比较高的新型提取物复方,为最终应用到畜禽养殖中提供科学依据。主要研究结果如下:1单种植物水提物的体外试验结果试验选取女贞子、桂枝等24种植物原料,制备0.5mg/μL生药的水提液。抑菌试验结果:石榴皮、青蒿、桂枝和肉桂对大肠杆菌抑制效果较强,抑菌率均高于50%,其他抑菌率较低或未检出抑菌效果。抗炎试验结果:除青蒿、补骨脂、鱼腥草和竹叶外,其余植物均可抑制LOX活力,石榴皮、鸡血藤、厚朴、柠檬和迷迭香的抑制率均高于90%。抗氧化试验结果:石榴皮、迷迭香和秦皮具有较强DPPH自由基清除能力,其IC50分别为0.08、0.31和0.71mg/mL,其余均在1.04~199.27 mg/mL之间。2植物水提物的组合及优势复方研究根据上述结果结合其性价比,选取石榴皮等5种原料为复方成分,采用正交设计进行不同配比研究,最终得出3个优势复方,分别以抑菌(C1)、抗炎(C2)和抗氧化(C3)功能为主。体外试验验证结果:C1、C2和C3的最小抑菌浓度(MIC)均为 125 mg/mL,抗炎 IC50 分别为 0.434、0.138 和 0.166 mg/mL,抗氧化 IC50 分别为 0.31、0.40 和 0.22 mg/mL。3复方安全应用剂量研究选取78只Balb/c雌性小鼠,按体重随机分为4个处理:对照组(灌胃生理盐水),C1、C2 和 C3 组,其中 C1、C2 和 C3 均设 125、250、500、1000mg/kg BW4个水平(灌胃相应水提液),试验期21天。试验结果:整个饲养试验期间,所有实验小鼠精神状态良好,毛色光亮、未见异常死亡现象;低剂量C1和C2对小鼠生长性能无不良影响,高剂量C3组小鼠的生长性能较差;在正常范围内,C1、C2有提高小鼠免疫器官指数的趋势,低剂量C1和C2组血液白细胞计数(WBC)极显著提高(P<0.01),各水平C3组小鼠免疫器官指数和血液白细胞计数(WBC)均无显著变化(P>0.05)。由此发现添加量过高可能会对小鼠的生长性能、脏器指数和血常规参数有负面影响,故复方的添加剂量应当低于250 mg/kg BW。4复方促生长效果研究根据安全应用剂量研究结果,选取C1和C2两个复方开展对小鼠促生长效果的研究。选取90只15g左右的Balb/c雌性小鼠,分为3组:对照组(正常饮水),C1组(饮水中添加0.6mg/mlC1)、C2组(饮水中添0.3mg/mlC2),每组设3个重复,试验期21天。试验结果表明:与对照组相比,C1、C2均可使小鼠日增重提高13.3%(P<0.01)。5复方对小鼠肠道健康的保护作用选取60只Balb/c雌性小鼠,分为4个处理:对照组(正常饮水)、LPS组(正常饮水)、LPS+C1组(饮水中添加C1)、LPS+C2组(饮水中添加C2),饲养试验至第21天,对照组注射生理盐水,其他3组注射LPS,分别于LPS注射后4h(8只)和24h(7只)屠宰、取样。LPS注射后4h试验结果表明:与对照组相比,LPS组空肠隐窝深度CD极显著升高(P<0.01),VH/CD极显著降低(P<0.01);与LPS组相比,LPS+C1和LPS+C2组VH/CD均极显著升高(P<0.01);LPS+C1组IL-6基因表达极显著降低(P<0.01);LPS+C2组IL-1β和IL-6表达分别降低40.1%和60.5%(P<0.01)。LPS注射后24h试验结果表明,与LPS组相比,LPS+C1组空肠VH极显著升高(P<0.01),VH/CD显著升高(P<0.05);LPS+C2组空肠VH极显著升高(P<0.01);LPS+C1组TLR4基因的表达量极显著降低(P<0.01);LPS+C2组IL-1β、IL-6、TNF-o、TLR4基因的相对表达量分别降低52.3%、59.5%、46.3%、57.9%(P<0.01)。综上,本课题研制出2个安全、有效的植物水提物复方(含石榴皮等5种组分),可通过增强机体免疫、抗炎及保护肠道健康等起到促生长作用。