【摘 要】
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目的 建立玻璃体切除液组织和细胞培养的新技术.方法 实验研究.采用随机数字表法,选取30例孔源性视网膜脱离(RRD)和48例增生性糖尿病视网膜病变(PDR)患者,经睫状体平坦部玻璃
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目的 建立玻璃体切除液组织和细胞培养的新技术.方法 实验研究.采用随机数字表法,选取30例孔源性视网膜脱离(RRD)和48例增生性糖尿病视网膜病变(PDR)患者,经睫状体平坦部玻璃体切除术后获得的玻璃体切除液标本,行0.5%荧光素钠反相标记玻璃体凝胶,经105U/L透明质酸酶和106U/L胶原酶Ⅰ联合消化,取沉淀混悬液接种于预置的0.01%多聚赖氨酸培养瓶中,倒置法培养24 h后,置入含30%胎牛血清的F12培养液中正置培养6 d,期间半量换液1次,动态观察增生膜片边缘细胞生长情况.结果 在0.01%多聚赖氨酸预置条件下,玻璃体切除液中的膜组织块经倒置培养24 h后均可半干燥贴壁,78例玻璃体切除液标本按上法贴壁,成功率100%.7d培养期间均未出现细菌、真菌及支原体污染.经0.5%荧光素钠标记,透明质酸酶联合胶原酶Ⅰ作用30 min,78例标本中玻璃体凝胶均被消化,消化率100%.部分增生膜边缘可见细胞迁移而出,呈现不同程度的生长和增生趋势.30例RRD标本中,细胞生长率43.33%(13/30);48例PDR标本中,细胞生长率37.50%(18/40),其中24例PDR-V标本中,细胞生长率41.67%(10/24).结论 酶解联合倒置半干燥细胞培养法可确保增生膜贴壁,短期培养既可避免污染,又可观察增生膜组织内细胞生长特性;该方法可用于增生膜细胞增殖活性的判断,有望成为一种预测增生性眼底疾病术后复发风险的新技术.
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